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产品名称：人重组高迁移率族蛋白B1(rHMGB-1)ELISA检测试剂盒

目录编号：JW.HU6457

产品规格：48T/96T

检测种属：人

是否包邮：是

能否代测：能

可售区域：全国

检测仪器：酶标仪

检测方法：ELISA酶联法

检测波长：450n

保质期：六个月

保存温度：2-8℃冷藏保存

运输方式：快递冷藏运输

产品用途：仅供科研使用，不得用于其他用途

检测样本：血清、血浆、尿液、组织匀浆、细胞培养上清液及相关液体样本等

样品收集、处理及保存方法

1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人重组高迁移率族蛋白B1(rHMGB-1)ELISA检测试剂盒注意事项

1.试剂盒使用前请保存在2-8℃。使用前室温平衡60分钟，复溶后的标准品若未用完，请废弃。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。

2.浓缩生物素化抗体，浓缩酶结合物体积小，运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000转/分离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。取用前，请用移液器小心吹打4-5次使溶液混匀。

3.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象，微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。（加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。

4.不同批号的试剂盒组份不能混用（洗涤液和反应终止液除外）。请提前咨询上海极威生物科技有限公司。

5.充分轻微混匀对反应结果尤为重要，最好使用微量振荡器(使用最低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻敲击酶标板框混匀。

6.预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。

7.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。试验中所用的试管和吸头均为一次性使用，严禁在不同的液体之间混用！否则将影响试验结果。

8.所有液体组分使用前充分摇匀。试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时，请按国家生物试验室安全防护条列执行。

9.如果分次使用，请根据需要量配制各组分，以免配制过多造成浪费而影响后续试验。实验中剩余的板孔请立即放回自封袋中用封板胶纸封住，放回铝箔袋中密封（低温干燥）保存，2个月内用完。

人重组高迁移率族蛋白B1(rHMGB-1)ELISA检测试剂盒操作步骤

1.从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；

4.随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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