1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-4h,若发现培养瓶破损 有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们.
2)静置完成后,请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10× , 20×) 各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据.
3)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基).
4)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况.若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养.若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理.传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收.
5)半贴细胞和贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收.
6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞.收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 .