7月16日,据极威生物Elisa试剂盒部门报道,在Elisa实验中,很多步骤操作不正确都会导致实验结果的偏差,以至于没有得到理想的结果,很多客户都知道样本的采集和保存不当会导致结果有偏差,但是很多客户不知道是,洗涤才是Elisa实验中的精髓所在.

为什么说洗涤才是Elisa实验中的精髓所在呢？虽然洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但是它却可以决定着实验的成败.ELSIA实验其实就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的.通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质.聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来.可以说在ELISA 操作中,洗涤是最主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎.

洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液.聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体.洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度.

洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用.如果洗液需要稀释,应按要求稀释,所用的水电导率最好在1.5us/cm 之下,洗液如果结晶应待其融解后配制.保证洗板浸泡时间为40 秒左右,孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡.

如果您在Elisa实验过程中遇到其他问题,可以随时咨询极威生物,我们会全力为您解决,如您对实验中的步骤不清晰,不想自己做实验,可以交给我们,我司可以安排专业的技术人员为您进行实验操作,保证结果可靠.