B103大鼠神经母细胞瘤细胞
Catalogue No.: C1586
Product Format: a T25 flask
Culture Properties：贴壁
Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Components
| Item | Specifications |
| a T25 flask | 2X106 |
| Manual | 1 copy |
Operation steps for cell culture
1. 吸走多余培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞；
2. 吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化；
（细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长.细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮.混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡.）
3. 加入6-8ml完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀；
4. 将混匀的细胞1000rpm（约150g）离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养；
传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代.
Cell cryopreservation
1.冻存液：92%完全培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择）
2.降温步骤：4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存.
Tips：
1. 细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象.贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清.加5ml PBS重悬细胞,再900-1000rpm(约150g)离心3min,用新鲜的完全培养基重悬接种到新的培养瓶.第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多,建议PBS多洗几次.
2. 细胞生长不均时,可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代.
3. 细胞生长缓慢时,可以选择提高血清浓度培养（最高不超过20%）,也可以根据细胞生长状态,选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养.
4. 不同细胞贴壁性差异比较大,所以消化时间差别较大,20s-10min均有可能,具体以细胞消化到相互分离但未脱落,并可以轻轻吹下为准,严禁消化到细胞完全漂浮.客户消化过度导致细胞死亡 漂浮 生长缓慢,不提供免费售后服务.
5. 干冰发货均为两支,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支.若客户同时复苏两支均状态不佳,我方不提供免费售后服务.
6. 细胞状态正常时,应尽快冻存细胞保种,冻存后应随机抽取一支检测冻存效果.我方不对客户冻存细胞导致死亡负责,客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务.
Notice：
客户收到细胞有任何疑问请及时致电我们,细胞收到后1周内没有任何电话,或其他形式回访,默认为细胞质量没问题,之后出了任何问题不给予免费售后.细胞免费售后只提供一次,若重发后再次培养死亡不再免费补发,细胞收货时已经死亡或密度不足的除外.
尊敬的客户：
您好！上海极威生物科技有限公司（Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.）成立于上海,是一家专业从事“产品研发 市场销售 技术服务”为一体的高科技生物技术公司.极威生物依托国内外技术研发人才的优势,由留美资深科学家与数位国内多年从事生物领域研究的博士 硕士等高校生物领域研究人员共同创立,在科学研究和医疗检测领域享有极高的声誉,经过多年的努力发展已成为专业供应各类生物科研用品的公司,长期专注于生物领域,旗下产品种类众多.极威生物秉承以产品质量为根本,以市场需求为导向,以为客户创造价值为己任的精神,致力于发展中国的科研事业.力求为我国生物科技事业提供更好的 更专业性的技术服务和科研产品.自公司成立以来,公司的销售额保持高速增长,企业规模不断扩大,研发产品包括elisa试剂盒,生化试剂盒,动物血制品,抗体,标准品,生化试剂,实验耗材等10万余种类,公司长期致力于elisa试剂盒 生化试剂盒的研发,为客户提供生化试剂盒 ELISA试剂盒 技术服务等一系列实验代测服务.
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