鸡CD8分子（CD8）试剂盒（ELISA）

使用说明书

l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样 本中鸡CD8分子（CD8）的含量。

l 有效期：6个月

l 保存条件：2-8℃

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被鸡CD8分子（CD8） 捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。 用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。 颜色的深浅和样品中的鸡CD8分子（CD8）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD  值），计算样品浓度。

样本处理及要求

1.    血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测， 或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.    血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂， 标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟， 或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.    细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃ 或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响最后检测结果， 因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材

1.   酶标仪（450nm）

2.   高精度加样器及枪头：0.5-10uL 、2-20uL 、20-200uL 、200-1000uL

3.   37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

试剂盒组成

备注：

1.    标准品浓度依次为：200 、100 、50 、25 、12.5 、0 U/mL

2.    经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中 直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本 进行适当稀释后再进行实验。

注意事项

1.    严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室 温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2.    洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中 不要让微孔干燥掉。

3.    消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD 值。

4.    底物显色液应呈无色或很浅的颜色， 已经变蓝的底物液不能使用。

5.    避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6.    在储存和温育时避免强光直接照射。

7.    平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8.    任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏 试剂盒中反应试剂的生物活性。