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血清抗体纯化试剂盒

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细胞生物学

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仪器耗材

酶标仪| 常规耗材| 进口耗材| 移液器| 其他小仪器|

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全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒产品说明书

点击次数:38次     发布时间:2024/11/13 15:07:40

主要用途

全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂是一种旨在X-Gal为底物,通过组织内β-半乳糖苷酶在酸性条件下稳定表达,催化生成深蓝色的沉积产物,从而在光学显微镜下观察到蓝色表达的组织细胞分布,作为细胞复制性衰老replicative senescence)的分子特征来识别和探测衰老组织的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的广泛应用于细胞生物学研究。其适用于各种人体和动物活体(in vivo)检测。产品即到即用,性能稳定,参数优化,着色敏感。

技术背景

细胞复制性衰老是细胞控制其生长潜能的保障机制。衰老细胞停滞在细胞周期的G1期,表现出细胞扁平、胀大、颗粒增多的形态特征,尤其在酸性条件下,细胞内β-半乳糖苷酶活性增加,而成为细胞衰老的生物学标记。全组织(WHOLE MOUNTEN BLOC)原位染色第一时间真实反应转染效果,组织形态维持良好,同时后续使用石蜡切片存档保存成为可能。

产品内容

清理液(Reagent A)      毫升

固定液(Reagent B       毫升

酸性液(Reagent C       毫升

稀释液(Reagent D       毫升

染色液(Reagent E       毫升

产品说明书            1

保存方式

保存染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里其余的保存在4℃冰箱里;稀释液(Reagent D)和染色液(Reagent E),用铝箔封裹,避免光照;有效保证6

用户自备

15毫升锥形离心管:用于配制染色工作液

恒温培养箱:用于染色孵育

切片仪:用于石蜡或冰冻切片

光学显微镜:观察染色后的组织细胞

实验步骤

实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E从-20的冰箱里取出,置入冰槽里等待溶化。然后移取xx毫升稀释液(Reagent D15毫升离心管,加入xx微升染色液(Reagent E,混匀后,置入暗室里,室温下,标记为染色工作液。然后进行下列操作:

1. 准备16孔细胞培养板

2. 放进新鲜切除的动物组织样本(注意:建议组织大小为0.5厘米厚,1厘米长;如果过大,最好刀切处理一下

3. 将组织压平

4. 小心加入xx毫升清理液(Reagent A,清洗组织样本

5. 小心抽去清理液

6. 小心加入xx毫升固定液(Reagent B,浸没整个组织

7. 4℃条件下孵育2小时

8. 小心抽去固定液

9. 小心加入xx毫升酸性液(Reagent C,清洗组织样本

10. 在室温下孵育15分钟

11. 小心抽去净化液

12. 重复实验步骤911一次

13. 小心加入xx毫升染色工作液,浸没整个组织

14. 放进37培养箱,孵育16小时,避免光照

15. 后续石蜡切片(6微米厚)或冰冻切片(10微米厚)

16. 在光学显微镜下观察和计数:表达β- 半乳糖苷酶活性的组织为阳性,呈现蓝色

注意事项

1. 本产品为10次(10个样本)操作

2. 操作时须戴手套

3. 使用时,避免污染母液,否则出现絮状沉淀,影响实验效果

4. 原始组织大小可以1厘米厚、2厘米长进行染色,但建议越小越佳

5. 本产品的参数:固着剂种类和浓度、pH、生色底物的选择和浓度等达到最优化

6. 染色工作液避免光照

7. 用户根据实际需求,按比例配制试剂用量

8. 染色孵育过程,避免光照

9. 组织β-半乳糖苷酶活性强,孵育3小时即显示阳性;组织β-半乳糖苷酶活性弱,则需要孵育24小时

10. 组织染色最长孵育时间为24小时

11. 本产品染色敏感,甚至对于微弱表达的酶活性仍然显色清晰;用户可以根据实际情况调整孵育时间和染色工作液浓度,使染色恰到好处

12. 孵育时避免液体蒸发

13. 组织呈现蓝色的部位为衰老组织特异性β-半乳糖苷酶活性的地方

14. 全组织染色存在其染色不均匀、组织内部染色渗透困难等局限

15. 染色后的后续处理的切片样品可以长期保存,同样须避免光照

16. 本公司提供系列细胞衰老分析试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定着色清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

订购信息

单组分订购信息

编号                      名称                      规格

G&VS10012.2    全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒     10

G&VS10012.2A    清理液(Reagent A)                     毫升

G&VS10012.2B    固定液(Reagent B                      毫升

G&VS10012.2C    酸性液(Reagent C                      毫升

G&VS10012.2D    稀释液(Reagent D                      毫升

G&VS10012.2E    染色液(Reagent E                    毫升 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10012.1

细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

100/250

G&VS10012.2

全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

10

G&VS10012.3

冰冻切片组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

50

G&VS10012.4

通用型组织细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

10/100

G&VS80056.1

细胞衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

50

G&VS80056.2

全组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

10

G&VS80056.3

冰冻切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

50

G&VS80056.4

石蜡切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

50

G&VS10037.1

细胞β-半乳糖苷酶化学发光法定量检测试剂盒

20

G&VS10037.2

细胞β-半乳糖苷酶比色法定量检测试剂盒

20

 

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