CAT#:JW-4-126501
常温运输和保存
产品及特点
Bodian染色法是美国科学家David Bodian 1936年首创的用于观察神经元、轴突和树突内神经原纤维的浸银染色法,其工作原理是把石蜡切片浸于银溶液中 ,再用还原液使银颗粒沉积于神经纤维上并呈棕色或棕黑色。本试剂盒即根据此方法开发,它具有下列特点:
1.一站式,用户不需要单独购买和配制各种溶液。
2.降低了背景色深,减轻了血管和胶原纤维的共染现象,便于观察神经纤维。
3.染色和还原时间更短,降低了脱片现象。
4.本试剂盒可用于细胞涂片、切片和实体组织的显色检测。
5.产品稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀。
6.本规格足够进行250张切片的染色(不含切片制备和脱蜡封固等试剂)。
7.本产品只能用于科研。
规格及成分
成份 编号 规格 包装
蛋白银(干粉) 4-126501a 2.5克 1 mL棕色瓶
铜箔(5×10 cm,0.5 g/张) 4-126501b 25张 塑料袋
还原液成分一(干粉) 4-126501c1 12.5 g 5 mL本色瓶
还原液成分二(干粉) 4-126501c2 2.5 g 2.0 mL棕色管
氯化金(干粉) 4-126501d 2.5 g 2.0 mL密封玻璃管
草酸(干粉) 4-126501e 5 g 2.0 mL蓝盖管
固定剂(干粉) 4-126501f 12.5 g 2.0 mL绿盖管
10 mL本色塑料瓶 无 4个 无
使用手册 4-126501sc 1份 无
本产品使用大纸盒包装
运输及保存
常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂
硝酸、Bodian专用固定液、冰乙酸、蒸馏水、显微镜、Coplin染色缸
使用方法
一:准备工作
1.配制蛋白银溶液(以配制10 mL为例,10 mL足够10张切片):在干净的培养细菌的玻璃培养皿中加入10 mL蒸馏水,再将蛋白银研磨成粉,称取0.1 g然后慢慢抖入到培养皿中,让蛋白银干粉在静止状态下缓慢溶解进入水中,期间不要摇晃,直到彻底溶解。蛋白银溶液必须现配现用。
2.配制还原液(以配制10 mL为例,10 mL足够10张切片):称0.5 g还原液成分一和0.1 g还原液成分二,加自备蒸馏水10 mL溶解即可。此溶液必须现配现用。本试剂盒提供的10 mL试剂瓶可以反复使用。
3.配制氯化金1%溶液:在本试剂盒提供的125 mL塑料瓶中加入100 mL自备蒸馏水,再加入1 g氯化金溶解待用。由于氯化金吸湿性非常强,一旦打开包装瓶,必须一次全部溶解。可以分装成小份,每份10 mL,冻存,每次只取10 mL使用,10 mL足够10张切片。塑料瓶可以重复使用。
4.配制草酸溶液:在本试剂盒提供的10 mL塑料瓶中加入10 mL自备蒸馏水,再加入0.2 g草酸溶解待用。10 mL本溶液足够处理10张切片。塑料瓶可以重复使用。
5.配制固定液:在本试剂盒提供的10 mL塑料瓶中加入10 mL自备蒸馏水,再加入0.5 g固定剂溶解待用。10 mL本溶液足够处理10张切片。塑料瓶可以重复使用。
二、切片的染色
6.固定组织并制备厚度为10-15 mm的切片。制备切片时最好使用自备的Bodian专用固定液(甲醛原液5 mL、冰乙酸5 mL、80%乙醇90 mL),但本染色法也跟其他常用的各种固定液兼容。本试剂盒不提供固定液。
7.将切片脱蜡至水。
8.在Coplin染色缸中加入10 mL第1步新鲜配制的蛋白银溶液,然后加入一张新鲜处理的铜箔(处理方法:在干净的培养细菌的玻璃培养皿中加入7 mL水和3 mL自备硝酸,混匀,用镊子将一片铜箔(约0.5 g)浸入到硝酸溶液中,硝酸溶液将去除其表面的氧化层,当铜箔表面变成金黄色时用镊子取出铜箔并迅速用自来水冲洗干净,折叠到适当大小并放入到装有蛋白银溶液的Coplin染色缸底部),然后放入切片,将染色缸密封后放37℃ 24-48小时。
9.用蒸馏水稍洗一下切片,洗去切片表面的染料。洗的时间不宜太长,否则会把染色去掉,只留下已被浸染的粗纤维。
10.把切片放入新制备的还原液中还原2-3分钟。
11.用蒸馏水彻底洗去还原液。
12.在1 mL 1%氯化金溶液中加入1.5 mL冰乙酸,混匀。将切片放入此1%氯化金溶液中调色10分钟。
13.用蒸馏水洗净。
14.如果此时切片呈淡紫色或蓝色则跳过此步,如果还不呈淡紫色,则将切片放入到草酸溶液中2-5分钟,直到切片呈浅紫色或蓝色时取出。
15.用自来水冲洗切片5分钟。
16.将切片放在固定液中固定5分钟。
17.自来水洗净切片。
18.对切片进行梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封固。本试剂盒不含相关试剂)。
19.显微观察切片:轴突、神经元纤维将呈现黑色或紫黑色。
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