CAT#:JW-4-110501-250
常温运输和保存

产品及特点
 Bodian染色法是美国科学家David Bodian 1936年首创的用于观察神经元、轴突和树突内神经原纤维的浸银染色法，其工作原理是把石蜡切片浸于银溶液中 ,再用还原液使银颗粒沉积于神经纤维上并呈棕色或棕黑色。传统Bodian法的染色是在37℃进行，Clark改良法将温度改为60℃，本试剂盒即根据改良方法开发，它具有下列特点：
1.一站式，用户不需要单独购买和配制各种溶液。
2.降低了背景色深，减轻了血管和胶原纤维的共染现象，便于观察神经纤维。
3.染色和还原时间更短，降低了脱片现象。
4.本试剂盒可用于细胞涂片、切片和实体组织的显色检测。
5.产品稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀。
6.本规格足够进行250张切片的染色（不含切片制备和脱蜡封固等试剂）。
7.本产品只能用于科研。
规格及成分
成份                                    编号                    规格                包装材料
蛋白银（干粉）                   4-110501a         2.5克               10mL棕色瓶
铜箔(5×10cm，0.5g/张)      4-110501b         25张                塑料袋
还原液成分一（干粉）        4-110501c1       12.5g               5mL本色瓶
还原液成分二（干粉）        4-110501c2       2.5g                 2.0mL棕色管
氯化金（干粉）                   4-110501d         2.5g                密封玻璃管
草酸（干粉）                       4-110501e         5g                   5.0mL本色瓶
固定剂（干粉）                   4-110501f          12.5g               10.0mL本色瓶
10mL本色塑料瓶                   无                      4个                 无
使用手册                              4-110501sc         1份                无
本产品使用大纸盒包装

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂
硝酸、Bodian专用固定液、冰乙酸、蒸馏水、显微镜、Coplin染色缸

使用方法
一：准备工作
1.配制蛋白银溶液（以配制10mL为例，10mL足够10张切片）：在干净的培养细菌的玻璃培养皿中加入10mL蒸馏水，再将蛋白银研磨成粉，称取0.1g然后慢慢抖入到培养皿中，让蛋白银干粉在静止状态下缓慢溶解进入水中，期间不要摇晃，直到彻底溶解。蛋白银溶液必须现配现用。
2.配制还原液（以配制10mL为例，10mL足够10张切片）：称0.5g还原液成分一和0.1g还原液成分二，加自备蒸馏水10mL溶解即可。此溶液必须现配现用。本试剂盒提供的10mL试剂瓶可以反复使用。
3.配制氯化金1%溶液：在本试剂盒提供的125mL塑料瓶中加入100mL自备蒸馏水，再加入1g氯化金溶解待用。由于氯化金吸湿性非常强，一旦打开包装瓶，必须一次全部溶解。可以分装成小份，每份10mL，冻存，每次只取10mL使用，10mL足够10张切片。塑料瓶可以重复使用。
4.配制草酸溶液：在本试剂盒提供的10mL塑料瓶中加入10mL自备蒸馏水，再加入0.2g草酸溶解待用。10mL本溶液足够处理10张切片。塑料瓶可以重复使用。
5.配制固定液：在本试剂盒提供的10mL塑料瓶中加入10mL自备蒸馏水，再加入0.5g固定剂溶解待用。10mL本溶液足够处理10张切片。塑料瓶可以重复使用。
二、切片的染色
6.固定组织并制备厚度为10-15um的切片。制备切片时最好使用自备的Bodian专用固定液（甲醛原液5mL、冰乙酸5mL、80%乙醇90mL），但本染色法也跟其他常用的各种固定液兼容。本试剂盒不提供固定液。
7.将切片脱蜡至水。
8.在Coplin染色缸中加入10mL第1步新鲜配制的蛋白银溶液，然后加入一张新鲜处理的铜箔（处理方法：在干净的培养细菌的玻璃培养皿中加入7mL水和3mL自备硝酸，混匀，用镊子将一片铜箔（约0.5g）浸入到硝酸溶液中，硝酸溶液将去除其表面的氧化层，当铜箔表面变成金黄色时用镊子取出铜箔并迅速用自来水冲洗干净，折叠到适当大小并放入到装有蛋白银溶液的Coplin染色缸底部），然后放入切片，将染色缸密封后放60℃温箱内染色4~16小时（或37℃24-48小时）。如果选择60℃染色，最好每1小时肉眼检测一次，当切片呈金棕色时即停止染色。如染色时间太短，只有较粗的纤维可被轻微的染上，如果染色过头则会产生过深背景。
9.用蒸馏水稍洗一下切片，洗去切片表面的染料。洗的时间不宜太长，否则会把染色去掉，只留下已被浸染的粗纤维。
10.把切片放入新制备的还原液中还原2-3分钟。
11.用蒸馏水彻底洗去还原液。
12.在1mL1%氯化金溶液中加入1.5uL冰乙酸，混匀。将切片放入此1%氯化金溶液中调色10分钟。
13.用蒸馏水洗净。
14.如果此时切片呈淡紫色或蓝色则跳过此步，如果还不呈淡紫色，则将切片放入到草酸溶液中2-5分钟，直到切片呈浅紫色或蓝色时取出。
15.用自来水冲洗切片5分钟。
16.将切片放在固定液中固定5分钟。
17.自来水洗净切片。
18.对切片进行梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封固。本试剂盒不含相关试剂）。
19.显微观察切片：轴突、神经元纤维将呈现黑色或紫黑色。

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