CAT#:JW-2-0205
低温运输,-80℃保存
产品及特点
该菌株来源于Origami B系列菌株,集合了BL21系列、Rosetta系列以及Origami系列菌株的优点,极大的增强了细胞内二硫键的形成和大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。其基因型是F–,ompT, hsdSB (rB–mB–) gal, dcm, lacY1, ahpC, (DE3), gor522::Tn10, trxB, pLysSRARE2 (CamR, KanR, TetR)。该菌株具有下列特点:
1.LacZY基因的突变能够通过诱导物IPTG高效控制目的基因的表达。
2.DE3是溶源性的l DE3,它带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。
3.含有pLysS质粒。该质粒能够表达T7溶菌酶,T7溶菌酶可以有效降低目的基因的基础表达水平。该质粒还使得该菌株具有氯霉素(Chl+)抗性,能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。
4.在TrxB和Gor基因上同时含有突变,使得该菌株能够更加高效地在细胞质内生成二硫键,提高含二硫键蛋白的正确折叠率。
5.TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那(Kan+)和四环素(Tet+)抗性,因此本菌株不能作为卡那和四环素抗性质粒的宿主菌。
6.本菌株还含有pRARE质粒,能够提供宿主菌所缺乏的六个稀有密码子(AUA、AGG、AGA、CUA、CCC和GGA)所对应的tRNA分子,增加了真核细胞蛋白的此宿主菌中的表达水平。
7.适用于pET系列载体及其他携带T7启动子的系列载体。
8.本产品含30%的甘油。
规格及成分
本产品使用塑料袋包装
成分 编号 规格 包装
大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLysS甘油菌菌种 2-0205 1 mL 2 mL菌种管
使用手册 2-0205sc 1份 无
运输及保存
低温运输,-80℃保种保存,有效期一年。
自备试剂
LB培养基(含50 mg/mL氯霉素)
使用方法
菌种的复活:
1.对-80℃保存的本产品
保存菌种复苏时,从冰箱中取出塑料冻存菌种管,立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动,直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启塑料冻存菌种管,取100~200 mL本产品,接种至3~5 mL新鲜LB培养基(含50 mg/mL氯霉素)中,过夜摇菌,然后制备质粒。
2.对液氮保存的本产品
保存菌种复苏与-80℃冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出塑料冻存菌种管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启塑料冻存菌种管,取100~200 mL本产品,接种至3~5 mL新鲜LB培养基(含50 mg/mL氯霉素)中,过夜摇菌,然后制备质粒。
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