CAT#:JW-12-0042 低温运输,-80℃保存 | |||||||||||||||||||||
| 产品及特点 本菌株是在大肠杆菌B系的、广泛用于外源蛋白表达的BL21(DE3)菌株中转入一个pLysS质粒而得,主要用于表达对宿主有毒性的、一般情况下很难表达的基因。它具有下列特点: 1. 染色体上携带由lacUV5启动子控制的T7 RNA 聚合酶基因,故在IPTG诱导下,可以高效表达T7启动子驱动的外源基因。 2. 携带pLysS质粒,该质粒使菌株为氯霉素(34ug/mL)抗性,其lysS基因编码的T7溶菌酶可以阻止T7 RNA聚合酶和其启动子的结合,阻断背景表达,故本菌株主要用于毒性蛋白的表达。 3. 由于pLysS的复制起始位点为p15A型,跟复制起始位点为ColE1和pMB1型的质粒兼容,故外源基因可以克隆到pUC系列或pBR322系列的质粒中,同时转入到宿主菌中。 4. 缺失lon和ompT两个蛋白酶基因,有利于外源蛋白的纯化。 5. EcoB系统Eco位点识别能力缺失,导致EcoB甲基化修饰和限制功能均失,甲基化和非甲基化质粒DNA均可转入本菌种。 6. 本菌株具有氯霉素抗性。 | ||||||||||||||||||||
| 基因型 大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌种的基因型是:B系,F-, pLysS, lon-11, Δ(ompT-nfrA)885, Δ(galM-ybhJ)884, lDE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5], Δ46, [mal+]K-12(lS), hsdS10(各文献上报道的基因型稍微有所不同,此处采用美国耶鲁大学Coli Genetic Stock Center的资料)。 大肠杆菌BL21(DE3) pLysS基因型符号及其含义列表如下:
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| 原始文献 Studier F.W. 1991. Use of bacteriophage T7 lysozyme to improve an inducible T7 expression system. J Mol Biol. 219(1):37-44. | ||||||||||||||||||||
| 规格及成分 本产品使用塑料袋包装
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| 运输及保存 低温运输,-80℃保种保存,有效期3年。 | ||||||||||||||||||||
| 使用方法 本产品可用于常规大肠杆菌感受态细胞制备、转化等实验,具体步骤请见分子克隆手册等工具书。 | ||||||||||||||||||||
| 关联产品 大肠杆菌TG1菌种 |