CAT#:JW-2-4909
低温运输,-80℃保存
产品及特点
本产品是大肠杆菌GM2163甘油菌菌种,该菌种是大肠杆菌K-12系衍生菌株,主要用于克隆和质粒制备。它具有如下特点:
1.是甲基化基因dam、dcm缺失菌株,以之为宿主制备的质粒DNA可被对dam、dcm甲基化敏感的内切酶切割。
2.无lacIqlacZΔM15,不可进行蓝白斑筛选。
3.转化效率不高,一般不用于质粒构建,只适用于质粒转化。
4.具有链霉素、氯霉素抗性。
5.本产品只可用于科研。
基因型
大肠杆菌GM2163菌种的基因型是:F-,ara-14,leuB6,fhuA31,lacY1,tsx78,glnV44,galK2,galT22,mcrA,dcm-6,hisG4,rfbD1,rpsL136,dam13::Tn9,xylA5,mtl-1,thi-1,mcrB1,hsdR2。
大肠杆菌GM2163菌株的基因型符号及其含义列表如下:
基因型符号 含义
F- 不携带F质粒。
ara-14 名字已经更新成araE14,不能利用阿拉伯糖。
leuB6 leuB基因突变,-异丙基苹果酸脱氢酶失活,不能合成亮氨酸。
fhuA31 抗T1噬菌体。
lacY1 半乳糖苷通透酶突变,不能转入半乳糖,使IPTG诱导增效。
tsx78 外膜蛋白突变,不被T6噬菌体感染,对大肠杆菌毒素K抗性。
glnV44 更名为glnX44(Am),抑制琥珀突变UGA,使琥珀终止子能编码谷氨酰胺,为部分噬菌体生长所需。
galK2 galactokinase半乳糖激酶失活,不能利用半乳糖,对2-脱氧半乳糖抗性。其571位的G突变成T,导致GAA突变成UAA。
galT22 半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶失活,不能利用半乳糖,对2-脱氧半乳糖抗性。
mcrA 丧失对CG中甲基化C的切割,e14原噬菌体携带。
dcm-6 胞嘧啶甲基化酶失活,CCWGG中的第二个C不再被甲基化,此为B系共同特点。
hisG4 不能合成组氨酸。
rfbD1 LPS合成缺失,有助于提高转化效率。
rpsL136 30S核糖体S12蛋白突变,导致对链霉素抗性。
dam13::Tn9 腺嘌呤甲基化酶失活,dam-13 中含转座子Tn9,氯霉素抗性。
xylA5 不能利用木糖。
mtl-1 不能利用甘露糖醇。
thi-1 已经更名为thiE1,不能合成硫氨(维生素B1)。
mcrB1 胱硫醚合成酶失活,不能合成甲硫氨酸,需额外补充。
hsdR2 EcoK系统的限制性内切酶Eco失活,细胞可以甲基化DNA,但不能降解没Eco位点已经甲基化的DNA。
规格及成分
本产品使用塑料袋包装
成分 编号 规格 包装
大肠杆菌GM2163甘油菌 2-4909 1 mL 2.0 mL菌种管
使用手册 2-4909sc 1 份 无
原始文献
Blattner, et al (1997) The complete genome sequence of Escherichia coli K-12. Science 277(5331), 1453-1462.
运输及保存
低温运输,-80℃保种保存,有效期一年。
使用方法
按常规操作在固体培养皿上划线涂板,得到单克隆后再进行后续的感受态细胞制备和转化表达等操作,具体步骤请见分子克隆手册等工具书。
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