本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
诺氟沙星(Norfloxacin)ELISA检测试剂盒使用说明书
检测原理
试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被诺氟沙星(Norfloxacin)抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的竞争抗原,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的诺氟沙星(Norfloxacin)呈负相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3. 植物萃取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测。花生样本处理方法:样本去壳粉碎,称取5g于100ml具塞三角瓶中,加入25ml 60%甲醇谁溶液和20ml正乙烷振荡10min,滤纸过滤,弃去1/4初滤液,收集其余滤液于125ml分液漏斗中,静置分层后放出下层60%甲醇水提溶液。现提取液2ml,加入2ml超纯水稀释,使提取液甲醇浓度为30%,此为样品代测液。
4. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度小于0.25ppb。
3. 检测范围: 0.1 - 6 ppb。
4. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
5. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
6. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
7. 有效期:6个月