CAT#:JW-220615-50
常温运输，有低温成分

动物和植物天然蛋白释放剂

产品及特点    
本产品用于快速提取动物和植物总蛋白 ，直接用于 SDS-PAGE 凝胶电泳和 Western印迹分析以及蛋白活性测定等 。本产品的其主要特点是：
1. 提取过程十分简便 ，匀浆离心即可 ，整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分 ，蛋白保持天然活性。
3. 适用于各种动植物组织材料 ，包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于 SDS-PAGE、2D 电泳、Western 印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5. 一次可以处理 100mg 左右的动物或植物样品 ，足够进行几十次 SDS-PAGE mini 胶电泳检测。
6. 本产品只能用于科研。

规格及成分    
本产品使用小扁盒包装

成份                                                编号                    规格            包装材料
动物和植物天然蛋白释放剂           220615a             50 mL        60 mL 棕色瓶
5×SDS-PAGE 上样液                    220624               1 mL        1.5mL 白盖管
使用手册                                      220615sc               1份                  无

运输及保存：常温运输和保存，但收到货后 5×SDS-PAGE 上样液需-20℃保存，频繁使用时可以放 4℃保存 ，产品有效期为出厂后一年。

使用方法
 一 ：匀浆法
注意：对致密的实体组织（如肌肉），最好用 Polytron 剪切式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品 100 mg ，剪刀剪成黄豆大小 ，转移到 10-15 mL 的塑料离心管中。
2. 加入 1mL 动物和植物蛋白释放剂 ，在冰上用 Polytron 剪切式匀浆机匀浆 ，直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到 1.5 mL 的塑料离心管中。
4. 4℃  12,000 g 离心 10 分钟 ，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液 ，可置于-70℃冰箱保 存或立即使用 。如果要立即进行 SDS-PAGE 电泳 ，可取部分到离心管中，加入 5× SDS-PAGE 上样缓冲液使其终浓度为 1×（加入样品体积的 1/4 即可，40uL 样品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上样缓冲液），在沸水中水浴 5 分钟后立即上样电泳。

二 ：直接研磨法
注意：可以使用玻璃和陶瓷的研钵 ，也可以使用与微量离心管匹配的研磨杵
1. 称取动物或植物组织样品 100 mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入 1mL 动物和植物蛋白释放剂 ，用研磨杵研磨 ，直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到 1.5 mL 的塑料离心管中。
4. 4℃  12,000g 离心 10 分钟 ，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液 ，可置于-70℃冰箱保 存或立即使用 。如果要立即进行 SDS-PAGE 电泳 ，可取部分到离心管中，加入 5× SDS-PAGE 上样缓冲液使其终浓度为 1×（加入样品体积的 1/4 即可，40uL 样品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上样缓冲液），在沸水中水浴 5 分钟后立即上样电泳。

三：液氮研磨法
注意：最好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约 100 mg 动物或植物组织样品 ，转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮 ，用研磨杵研磨成粉。
3. 加入 1mL 动物和植物蛋白释放剂，然后将溶液全部转移到 1.5 mL 的塑料离心管中。
4. 4℃  12,000 g 离心 10 分钟 ，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液 ，可置于-70℃冰箱保 存或立即使用 。如果要立即进行 SDS-PAGE 电泳 ，可取部分到离心管中，加入 5× SDS-PAGE 上样缓冲液使其终浓度为 1×（加入样品体积的 1/4 即可，40uL 样品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上样缓冲液），在沸水中水浴 5 分钟后立即上样电泳。

注意：
1 ．如果 4℃  12,000 g 离心 10 分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀 ，可以将上清转移到一个新的离心管中后再 4℃  12,000 g 离心 10 分钟，以去除可见的小碎片。
2 ．植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物 ，如果需要除去植 物蛋白样品中残存的色素等杂质 ，可以在最后得到的上清液中加入 5 倍体积的冷丙酮或冷甲醇 ，混匀后-20℃放置 1 小时或过夜 ，然后 4℃  12,000 rpm 离心 10min ，弃上清后室温风干 3-5 分钟 ，然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可 。经过此纯化处理后 ，部分蛋白质可能会发生变性 ，不能再用于活性检测。

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