主要用途
冰冻切片氧化应激活性氧超氧阴离子 MitoSOX 红色荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂 MitoSOX ,在线粒体氧化损伤条件下,产生红色荧光,来检测冰冻组织细胞线粒体内超氧阴离子活性氧族 的存在状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适宜于冰冻动物组织细胞 线粒体内的超氧阴离子分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格 无菌,即到即用,操作简易,定性检测,性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基 (hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧 自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO- ) 次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等 细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡。其中线粒体氧 化磷酸化副产物之一是超氧阴离子,为线粒体内最主要的活性氧族,与心血管疾病,包括高血压、冠状动 脉硬化、糖尿病相关的血管疾病、神经退行性疾病(巴金森氏症、阿茨罕默症、肌萎缩硬化症)相关。MitoSOX 是一种完全自由通过细胞膜,并选择性在活体细胞线粒体内长期滞留而不外漏的染色剂。一旦被超氧自由 基阴离子氧化,便产生荧光。据此证明细胞线粒体内超氧阴离子活性氧族的存在。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
染色液(Reagent B) 微升
稀释液(Reagent C) 毫升
产品说明书 1 份
保存方式
保存染色液(Reagent B)在-20℃冰箱里,严格避免光照;其余的保存在 4℃冰箱里;有效保证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管:用于工作液配制的容器
培养箱或恒温水槽:用于染色孵育
(共聚焦)荧光显微镜:用于观察荧光组织细胞
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent B)置入冰槽里融化,稀释液(Reagent C)置于室温预热。然后移出 xx 微升染色液(Reagent B)到新的 1.5 毫升离心管,加入 xx 微升稀释液(Reagent C),混匀后,标记为染色工作液,置入暗室里。然后进行下列操作。
1 . 准备 5 片待测的厚为 10 微米的未经固着处理的冰冻切片
2 . 置于室温下,小心加上 xx 微升预冷的清理液(Reagent A),铺满整个切片表面
3 . 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
4 . 小心加上 xx 微升室温预热的染色工作液,铺满整个切片表面
5 . 在 37℃湿润培养箱里,孵育 10 分钟(注意:避免液体蒸发)
6 . 小心移去切片上的染色工作液,避免光照
7 . 小心加上 xx 微升清理液(Reagent A),铺满整个切片表面
8 . 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
9 . 放上盖玻片或封片
10 .即刻在(共聚焦)荧光显微镜下观察(定性检测):激发波长 510nm,散发波长 580nm―― 红色荧光增 强,表明超氧阴离子含量高
注意事项
1 . 本产品为 20 次操作
2 . 建议使用新鲜组织(手术切除后 1 小时内)制成的冰冻切片
3 . 操作时,须戴手套
4 . 染色工作液避免光照
5 . 孵育时,须避免光照
6 . 建议组织染色完成后,即刻进行荧光定性分析
7 . 本公司提供系列活性氧检测试剂产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能稳定
2 . 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺” 的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10460.2 冰冻切片氧化应激活性氧超氧阴离子红色荧光测定试剂盒 20 次
G&VS10460.2A 清理液(Reagent A) 毫升
G&VS10460.2B 染色液(Reagent B) 微升
G&VS10460.2C 稀释液(Reagent C) 毫升
试剂盒订购信息
产品编号 名称 规格
G&VS10111.1 细胞内氧化应激活性氧超氧阴离子红色荧光测定试剂盒 20 次
G&VS10111.2 冰冻切片氧化应激活性氧超氧阴离子红色荧光测定试剂盒 20 次
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G&VS10111.4 植物氧化应激活性氧超氧阴离子红色荧光测定试剂盒 20 次
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G&VS10067.2 冰冻切片氧化应激活性氧超氧阴离子原位染色试剂盒 50 次
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G&VS10067.4 细胞培养液氧化应激活性氧超氧阴离子比色法定量检测试剂盒 100 次
G&VS10096. 1 细胞超氧阴离子比色法定量检测试剂盒 20 次
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G&VS10460.2 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)MitoSOX 红色荧光测定试剂盒(超氧阴离子) 50 次
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(超氧阴离子) 20 次
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G&VS10460.6 活体组织氧化应激活性氧(ROS)MitoSOX 红色荧光测定试剂盒(超氧阴离子) 20 次
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