细胞脂质尼罗红染色试剂盒 Cellular Lipids Nile Red Staining Kit

CAT#:JW-11-230745
低温运输，-20℃保存

产品及特点：   
脂质是一种低极性（疏水性）的天然大分子混合物，包括脂肪酸及其衍生甘油  酯和磷脂，以及固醇类物质，例如胆固醇。细胞浆脂滴的形成是正常细胞生理过程， 脂滴由中性脂质构成，通常为甘油三酯脂滴，为能量储备；少部分为胆固醇酯脂滴， 作为过多细胞胆固醇的存储 。尼罗红(Nile red)染色剂是一种亲脂性的恶嗪类黄光  染料，与腊酯、甘油三酯以及各种脂肪酸等脂类物质结合后，在激发波长 543nm  的激发下 ， 显示强烈橘黄色荧光(散发波长 598m) 。 同时在紫外光的照射下显示  红色。细胞脂质尼罗红染色试剂是一种旨在使用高度脂溶性恶嗪类荧光染料尼罗红  染色技术，特异性地使细胞内中性脂质显示红色荧光，以分析细胞样品中脂质状况  的权威而经典的技术方法。本试剂盒就是基于上述原理对细胞脂质进行染色的试剂盒 ，它具有下列特点：
1.    即开即用 ，操作简捷 ，性能稳定 ，着色清晰。
2.   适用于各种人体和动物细胞样本的成脂细胞定性、细胞病理学分析和识别等研究。
3.   本产品只可用于科研。

规格及成分：   
本产品采用小扁盒包装

成分                                              编号           规格          包装
细胞脂质尼罗红染色试剂 A    11-230745a    50 mL    60 mL 棕色瓶
细胞脂质尼罗红染色试剂 B    11-230745b    0.2 mL    0.5 mL 棕色管
细胞脂质尼罗红染色试剂 C    11-230745c    40 mL    60 mL 本色瓶
使用手册                                 11-230745sc    1 份       无

运输及保存：低温运输 ，-20℃保存 ，保存期限为 1 年 ，避免光照。
自备试剂：1×PBS ， 1.5 mL 离心管 ，荧光显微镜。

使用方法：
一、细胞脂质尼罗红染色工作液的配制
1.实验开始前 ，将试剂盒里的细胞脂质尼罗红染色试剂 B 和 C 冻融 ，按B:C= 1:200  的比例配制染色工作液，注意避光操作，且必须现配现用，在 1h内使用完毕。

二、冰冻切片染色
2.取出待测的冰冻切片 ，复温 3 min。
3.向切片上滴加细胞脂质尼罗红染色试剂 A ，铺满整个组织 ，室温固定15-20min 。 1×PBS 洗 3 次 ，每次  1min。
4.向切片上滴加细胞脂质尼罗红染色工作液 ，室温避光孵育  10 min。
5.1×PBS 清洗切片  1-2  次 ，每次 30 s ，至无红色染料脱出。
6.加上盖玻片制备临时切片或使用  S2100-抗荧光衰减封片剂封片，然后在荧光 显微镜下观察 ：激发波长 543nnm ，散发波长 598nm（脂滴着色） 和紫外光（核着色）。

三、贴壁细胞染色：
7.小心吸除培养皿或六孔板里的培养液。
8.小心加入1 mL 1×PBS ，温柔清洗细胞表面 ，重复  1-2  次每次  30s。
9.小心吸除培养皿或六孔板里的清洗液。
10.加入1 mL 细胞脂质尼罗红染色试剂 A ，覆盖细胞表面 ， 固定  10- 15 min。
小心吸除固定液。
11.加入1mL 1×PBS ，清洗细胞表面 ，重复  1-2  次 。小心吸除清洗液。
12.加入适量细胞脂质尼罗红染色工作液 ，室温避光孵育  10min ，小心吸除细胞脂质尼罗红染色工作液。
13.小心加入  1 mL 1×PBS ，摇晃清洗细胞表面  30s- 1 min ，重复  1-2  次。
14.最后一次清洗液不弃去，注意避光保存并在 30 min  内用荧光显微镜下观察：
激发波长 543nnm ，散发波长 598nm（脂滴着色）和紫外光（核着色）。

四、染色结果观察
15.染色完成后,即刻进行荧光检测分析 。在荧光显微镜下观察可发现脂类物质呈红色或橘黄色荧光 ，细胞核呈亮蓝色荧光。

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