| 发货形式 | T25 瓶 | 冻存管 |
1 | 快递保存温度 | 室温 | 液氮长期保存或-80 度 3 天以内 |
2 | 初步平衡 | T25 瓶表面消毒后 ,放培养箱平衡复 温 2h 以上 | 无须平衡 ,直接放入-80 冰箱或者液氮 罐保存 |
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处理方式 | 吸走大部分培养基离心备用 ,留 10- 12ml 培养基 ,拍照并观察细胞。密度 80%以上即可吸走培养基消化传代, 若密度低于 80%可以留 10-12 ml 继续 培养至细胞密度 80%以上再进行传代 培养 | 37 度水浴摇晃尽快融化细胞 ,直接在 冻存管内将细胞离心。离心转速以离心 力 150g(约 900rpm)左右 , 1min 为 宜 ,弃上清 ,沉淀用新鲜培养基重悬后 接种到 10cm培养皿 ,显微镜下观察细 胞并拍照 ,24h 后换液一次 |
4 | 接种方式 | T25 传代首次建议 1:2 传代 ,即瓶 T25 传成两瓶 | 一管细胞建议接种到 10cm培养皿或者 T25 瓶 |
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注意事项 | 若细胞出现漂浮 ,可以先收集瓶内细 胞悬液 ,离心收集细胞 ,用胰酶消化 后重新接种到新的培养瓶内 , 由于发 货会出现漂浮的细胞贴壁本身较弱 , 建议使用高贴附培养瓶或提前包被过 的培养瓶培养细胞 发货 T25 瓶装满大约有 75ml 培养基, 静置后上部不含细胞的培养基可以收 集起来 , 1500rpm 离心 5min后 ,取 上清 4 度保存 ,用于培养细胞 ,以平 稳过渡到客户自己的培养基 | 收货时若发现干冰化完 ,检查冻存管是 否融化 ,若已融化需直接离心细胞接种 观察 ,若未融化可以将细胞按正常步骤 保存 ,以上情况及时反馈 干冰发货的细胞只能在-80 保存 3 天左 右 ,长时间保存会出现活性下降。干冰 发货均为两支 ,客户先复苏一支 ,若复 苏失败及时联系我方并在我方指导下复 苏第二支。若客户同时复苏两支均状态 不佳 ,我方将不提供免费售后服务 |
特殊情况:
1. 若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况,及时拍照联系销售反馈,按指导进行进一 步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管,请放心使用。
2. 若无法观察到细胞,建议收集细胞培养基,1200rpm 离心 5min,观察细胞沉淀量,并 用少量培养基重悬沉淀后,取部分悬液放到计数板或者载玻片上观察细胞。
3. 部分细胞增殖较快,发货细胞量较多时,培养基可能出现颜色变黄现象。继续培养使 用此类培养基时,需要及时观察培养基颜色变化,缩短培养基换液周期,并每瓶多加 2-3ml 培养基。
4. 收货当天不处理细胞时,T25 瓶可以消毒拆封口膜后不拧开瓶盖放培养箱静置过夜,但 不建议超过 24h;冻存管可以直接放液氮长期保存或-80 度 3 天以内,必须一周内复苏 一只培养检查,否则将超过一周售后期。