主要用途
细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂是一种旨在以X-Gal为底物,通过细胞内β-半乳糖苷酶在酸性条件下稳定表达,催化生成深蓝色的沉积产物,从而在光学显微镜下观察到蓝色表达的细胞作为细胞复制性衰老(replicative senescence)的分子特征来识别和探测衰老细胞的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。广泛应用于细胞生物学研究。其适用于各种人体和动物细胞或活体内(in vivo)检测。产品即到即用,性能稳定,参数优化,着色敏感,堪称国际上同类产品最佳。
技术背景
细胞复制性衰老是细胞控制其生长潜能的保障机制。衰老细胞停滞在细胞周期的G1期,表现出细胞扁平、胀大、颗粒增多的形态特征,尤其在酸性条件下,细胞内β-半乳糖苷酶活性增加,而成为细胞衰老的生物学标记。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
固定液(Reagent B) 毫升
酸性液(Reagent C) 毫升
稀释液(Reagent D) 毫升
染色液(Reagent E) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;稀释液(Reagent D)和染色液(Reagent E)用铝箔封裹,避免光照;有效保证6月
用户自备
2毫升离心管:用于配制染色工作液
15毫升锥形离心管:用于配制染色工作液
恒温培养箱:用于染色孵育
光学显微镜:用于观察染色后的细胞
实验步骤
操作一、25cm2细胞培养瓶染色
实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E)从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取xx毫升稀释液(Reagent D)到2毫升离心管,加入xx微升染色液(Reagent E),混匀后,放进37℃恒温水槽里预热,标记为染色工作液。然后进行下列操作:
1. 小心抽去25cm2细胞培养瓶里的培养液
2. 小心加入xx毫升清理液(Reagent A),清洗生长中的细胞表面
3. 小心抽去清理液
4. 小心加入xx毫升固定液(Reagent B),覆盖整个生长表面
5. 在室温下孵育5分钟
6. 小心抽去固定液
7. 小心加入xx毫升酸性液(Reagent C),清洗细胞表面
8. 小心抽去酸性液
9. 重复实验步骤7和8一次
10. 小心加入xx毫升染色工作液,覆盖整个细胞表面
11. 放进37℃培养箱,孵育3小时至16小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发)
12. 在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色。
操作二、24孔细胞培养板染色
实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E)从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取xx毫升稀释液(Reagent D)到15毫升锥形离心管,加入xx微升染色液(Reagent E),混匀后,放进37℃恒温水槽里预热,标记为染色工作液。然后进行下列操作。
1.小心抽去24孔细胞培养板里的培养液
2.每孔加入xx微升清理液(Reagent A),清洗生长中的细胞表面
3.小心抽去每孔里的清理液
4.每孔加入xx微升固定液(Reagent B),覆盖整个生长表面
5.在室温下孵育5分钟
6.小心抽去固定液
7.每孔加入xx微升酸性液(Reagent C),清洗细胞表面
8.小心抽去酸性液
9.重复实验步骤7和8一次
10.每孔加入xx微升染色工作液,覆盖整个细胞表面
11.放进37℃培养箱,孵育3小时至16小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发)
12.在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色
注意事项
1. 本产品为100次(4个24孔板)或20次(20个25cm2细胞培养瓶)操作
2. 操作时,须戴手套
3. 本产品的参数:固着剂种类和浓度、pH、生色底物的选择和浓度等达到最优化
4. 使用时,避免污染母液,否则出现絮状沉淀,影响实验效果
5. 染色工作液避免光照
6. 细胞β-半乳糖苷酶活性强,孵育3小时即显示阳性;细胞β-半乳糖苷酶活性弱,则需要孵育24小时
7. 细胞染色最长孵育时间为24小时
8. 孵育时避免液体蒸发
9. 本产品染色敏感,甚至对于微弱表达的酶活性仍然显色清晰;用户可以根据实际情况调整孵育时间和染色工作液浓度,使染色恰到好处
10. 细胞呈现蓝色的部位为衰老细胞特异性β-半乳糖苷酶活性的地方
11. 染色后的细胞样品可以在4℃冰箱里长期保存,同样须避免光照
12. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应调整处理液:
操作容器 | 建议处理液规格 |
载玻片 | 100微升 |
载玻片培养皿 | 1毫升 |
35mm培养皿 | 1毫升 |
96孔培养板 | 100微升 |
48孔培养板 | 200微升 |
24孔培养板 | 500微升 |
12孔培养板 | 1毫升 |
6孔培养板 | 2毫升 |
25cm2细胞培养瓶 | 3毫升 |
13. 本公司提供系列细胞衰老分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定着色敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS10012.1 细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒 100/250次
G&VS10012.1A 清理液(Reagent A) 500毫升
G&VS10012.1B 固定液(Reagent B) 500毫升
G&VS10012.1C 酸性液(Reagent C) 500毫升
G&VS10012.1D 稀释液(Reagent D) 100毫升
G&VS10012.1E 染色液(Reagent E) 50毫升
产品编号 | 名称 | 规格 |
G&VS10021 | 细胞周期流式细胞分析试剂盒 | 100次 |
G&VS10033 | BrdU标记法细胞繁殖流式细胞仪检测试剂盒 | 10次 |
G&VS10034.1 | BrdU标记法载玻片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒 | 10次 |
G&VS10034.2 | BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒 | 10次 |
G&VS10034.3 | BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒 | 10次 |
G&VS10034.4 | BrdU标记法载玻片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒 | 10次 |
G&VS10034.5 | BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒 | 10次 |
G&VS10034.6 | BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒 | 10次 |
G&VS10012.1 | 细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 | 100/250次 |
G&VS10012.2 | 全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 | 10次 |
G&VS10012.3 | 冰冻切片组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 | 50次 |
G&VS10012.4 | 通用型组织细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 | 10/100次 |
G&VS80056.1 | 细胞衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 | 50次 |
G&VS80056.2 | 全组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 | 10次 |
G&VS80056.3 | 冰冻切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 | 50次 |
G&VS80056.4 | 石蜡切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 | 50次 |
G&VS30072 | P16蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 5次 |
G&VS30073 | P21蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 5次 |
G&VS20104 | P16基因表达北方杂交分析试剂盒 | 5次 |
G&VS20105 | P21基因表达北方杂交分析试剂盒 | 5次 |
G&VS20106.1 | 端粒酶活性TRAP电泳分析试剂盒 | 20次 |
G&VS20106.2 | 端粒酶活性TRAP实时定量检测试剂盒 | 20次 |
G&VS20107 | hTERT表达实时定量检测试剂盒 | 20次 |
G&VS10037.1 | 细胞β-半乳糖苷酶化学发光法定量检测试剂盒 | 20次 |
G&VS10037.2 | 细胞β-半乳糖苷酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |