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细胞生物学

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仪器耗材

酶标仪| 常规耗材| 进口耗材| 移液器| 其他小仪器|

进口试剂

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细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒产品说明书

点击次数:33次     发布时间:2024/6/17 14:41:02

主要用途

细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂是一种旨在X-Gal为底物,通过细胞内β-半乳糖苷酶在酸性条件下稳定表达,催化生成深蓝色的沉积产物从而在光学显微镜下观察到蓝色表达的细胞作为细胞复制性衰老replicative senescence)的分子特征来识别和探测衰老细胞的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。广泛应用于细胞生物学研究其适用于各种人体和动物细胞或活体内(in vivo检测。产品即到即用,性能稳定,参数优化,着色敏感,堪称国际上同类产品最佳。

技术背景

细胞复制性衰老是细胞控制其生长潜能的保障机制。衰老细胞停滞在细胞周期的G1期,表现出细胞扁平、胀大、颗粒增多的形态特征,尤其在酸性条件下,细胞内β-半乳糖苷酶活性增加,而成为细胞衰老的生物学标记。

 

产品内容

清理液(Reagent A)        毫升

固定液(Reagent B       毫升

酸性液(Reagent C      毫升

稀释液(Reagent D       毫升

染色液(Reagent E        毫升

产品说明书          1份

 

保存方式

保存染色液(Reagent E)在-20冰箱里其余的保存在4冰箱里;稀释液(Reagent D)和染色液(Reagent E)用铝箔封裹,避免光照;有效保证6

 

用户自备

2毫升离心管:用于配制染色工作液

15毫升锥形离心管:用于配制染色工作液

恒温培养箱:用于染色孵育

光学显微镜:用于观察染色后的细胞

 

实验步骤

操作一、25cm2细胞培养瓶染色

实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E从-20的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取xx毫升稀释液(Reagent D2毫升离心管,加入xx微升染色液(Reagent E,混匀后,放进37℃恒温水槽里预热,标记为染色工作液。然后进行下列操作:

1. 小心抽去25cm2细胞培养瓶里的培养液

2. 小心加入xx毫升清理液(Reagent A,清洗生长中的细胞表面

3. 小心抽去清理液

4. 小心加入xx毫升固定液(Reagent B,覆盖整个生长表面

5. 在室温下孵育5分钟

6. 小心抽去固定液

7. 小心加入xx毫升酸性液(Reagent C,清洗细胞表面

8. 小心抽去酸性液

9. 重复实验步骤78一次

10. 小心加入xx毫升染色工作液,覆盖整个细胞表面

11. 放进37培养箱,孵育3小时至16小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发

12. 在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色。

 

操作二、24孔细胞培养板染色

实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E从-20的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取xx毫升稀释液(Reagent D15毫升锥形离心管,加入xx微升染色液(Reagent E,混匀后,放进37℃恒温水槽里预热,标记为染色工作液然后进行下列操作。

 

1.小心抽去24孔细胞培养板里的培养液

2.每孔加入xx微升清理液(Reagent A,清洗生长中的细胞表面

3.小心抽去每孔里的清理液

4.每孔加入xx微升固定液(Reagent B,覆盖整个生长表面

5.在室温下孵育5分钟

6.小心抽去固定液

7.每孔加入xx微升酸性液(Reagent C,清洗细胞表面

8.小心抽去酸性液

9.重复实验步骤78一次

10.每孔加入xx微升染色工作液,覆盖整个细胞表面

11.放进37培养箱,孵育3小时至16小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发

12.在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色

 

注意事项

1. 本产品为100次(424孔板)或20次(2025cm2细胞培养瓶)操作

2. 操作时,须戴手套

3. 本产品的参数:固着剂种类和浓度、pH、生色底物的选择和浓度等达到最优化

4. 使用时,避免污染母液,否则出现絮状沉淀,影响实验效果

5. 染色工作液避免光照

6. 细胞β-半乳糖苷酶活性强,孵育3小时即显示阳性;细胞β-半乳糖苷酶活性弱,则需要孵育24小时

7. 细胞染色最长孵育时间为24小时

8. 孵育时避免液体蒸发

9. 本产品染色敏感,甚至对于微弱表达的酶活性仍然显色清晰;用户可以根据实际情况调整孵育时间和染色工作液浓度,使染色恰到好处

10. 细胞呈现蓝色的部位为衰老细胞特异性β-半乳糖苷酶活性的地方

11. 染色后的细胞样品可以在4冰箱里长期保存,同样须避免光照

12. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应调整处理液:

操作容器

建议处理液规格

载玻片

100微升

载玻片培养皿

1毫升

35mm培养皿

1毫升

96孔培养板

100微升

48孔培养板

200微升

24孔培养板

500微升

12孔培养板

1毫升

6孔培养板

2毫升

25cm2细胞培养瓶

3毫升

 

13. 本公司提供系列细胞衰老分析试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定着色敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

编号                  名称                规格

G&VS10012.1   细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒        100/250

G&VS10012.1A    清理液(Reagent A                    500毫升

G&VS10012.1B    固定液(Reagent B               500毫升

G&VS10012.1C    酸性液(Reagent C                       500毫升

G&VS10012.1D    稀释液(Reagent D                100毫升

G&VS10012.1E    染色液(Reagent E                  50毫升

 

产品编号

名称

规格

G&VS10021

细胞周期流式细胞分析试剂盒

100次

G&VS10033

BrdU标记法细胞繁殖流式细胞仪检测试剂盒

10次

G&VS10034.1

BrdU标记法载玻片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒

10次

G&VS10034.2

BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒

10次

G&VS10034.3

BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒

10次

G&VS10034.4

BrdU标记法载玻片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒

10次

G&VS10034.5

BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒

10次

G&VS10034.6

BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒

10次

G&VS10012.1

细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

100/250次

G&VS10012.2

全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

10次

G&VS10012.3

冰冻切片组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

50次

G&VS10012.4

通用型组织细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

10/100次

G&VS80056.1

细胞衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

50次

G&VS80056.2

全组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

10次

G&VS80056.3

冰冻切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

50次

G&VS80056.4

石蜡切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒

50次

G&VS30072

P16蛋白表达西方杂交分析试剂盒

5次

G&VS30073

P21蛋白表达西方杂交分析试剂盒

5次

G&VS20104

P16基因表达北方杂交分析试剂盒

5次

G&VS20105

P21基因表达北方杂交分析试剂盒

5次

G&VS20106.1

端粒酶活性TRAP电泳分析试剂盒

20次

G&VS20106.2

端粒酶活性TRAP实时定量检测试剂盒

20次

G&VS20107

hTERT表达实时定量检测试剂盒

20次

G&VS10037.1

细胞β-半乳糖苷酶化学发光法定量检测试剂盒

20

G&VS10037.2

细胞β-半乳糖苷酶比色法定量检测试剂盒

20

 

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