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细胞生物学

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细胞总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒产品说明书

点击次数:15次     发布时间:2024/6/17 13:59:05

 

主要用途

细胞总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂是一种旨在通过使胆固醇荧光染料菲律宾(FILIPIN特异性与胆固醇结合,形成复合体,并产生蓝色荧光现象,以此检测总胆固醇的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于各种细胞(动物、人体等)或培养细胞中总胆固醇分布的检测。广泛用于细胞病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,荧光清晰。

技术背景

胆固醇(cholesterol)是一类称之为固醇类(sterols)或聚类异戊二烯(polyisoprenoid)或三萜皂甙元(triterpene)的多环化合物(polycyclic compound)。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离(free form)和脂化结合(ester)两种形式广泛存在于所有动物组织中,主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾(FILIPIN)是一类由四种同分异构体的多烯抗生素(polyene antibiotics)或多马霉素(polyene macrolide)的总称。源自于S. FILIPINENSIS细菌的培养液中。其分子式为C35H58O11,分子量为654.8。首先胆固醇酯酶(cholesterol esterase)的水解下,酯化胆固醇(cholesterel ester转化为游离胆固醇,然后使用菲律宾与所有游离胆固醇结合形成聚集体或复合物,产生荧光。

产品内容

清理液(Reagent A  毫升

固着液(Reagent B  毫升

水解液(Reagent C  毫升

抗干扰液(Reagent D  毫升

染色液(Reagent E  毫升

产品说明书  1

保存方式

保存水解液(Reagent C)和染色液(Reagent E在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存4℃冰箱里有效保证6

用户自备

荧光显微镜:用于样品染色后观察分析

实验步骤

一、 样本固着处理

1. 准备148孔细胞培养板的细胞或载波片的细胞

2. 小心抽去48孔细胞培养板里的培养液  

3. 小心加入xx微升清理液(Reagent A,铺满整个样品表面

4. 小心移去清理液(Reagent A

5. 重复实验步骤34二次

6. 小心加入xx微升固着液(Reagent B,铺满整个样品表面

7. 室温下孵育30分钟

8. 小心移去固着液(Reagent B

9. 小心加入xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面

10. 小心移去清理液(Reagent A

11. 重复实验步骤910二次

二、样本染色处理

1. 小心加xx微升水解液(Reagent C,铺满整个样品表面

2. 室温下孵育1小时(注意:可以延长至4小时,避免干枯)

3. 小心移去水解液(Reagent C

4. 小心加xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面

5. 小心移去清理液(Reagent A

6. 重复实验步骤45一次

7. 小心加入xx微升抗干扰液(Reagent D,铺满整个样品表面

8. 室温下孵育10分钟

9. 小心移去抗干扰液(Reagent D

10. 小心加入xx微升染色液(Reagent E,铺满整个样品表面

11. 室温下孵育30分钟,避免光照

12. 小心移去染色液(Reagent E

13. 小心加入xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面

14. 小心移去清理液(Reagent A

15. 重复实验步骤1314二次

16. 小心加入xx微升清理液(Reagent A

17. 即刻在荧光显微镜下观察:激发波长:340nm;散发波长:430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

注意事项

1. 本产品为20次(48孔细胞培养板)操作

2. 操作时,须戴手套

3. 操作时,避免污染母液

4. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面

5. 样品染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察 

6. 荧光容易受到光漂白(photobleach),建议使用抗淬灭剂12058.2

7. 本产品使用载玻片细胞染色后,可用于电镜分析

8. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应调整处理液:

 

操作容器

建议处理液规格

载玻片

100微升

载玻片培养皿

1毫升

35mm培养皿

1毫升

96孔培养板

100微升

48孔培养板

200微升

24孔培养板

500微升

12孔培养板

1毫升

6孔培养板

2毫升

25cm2细胞培养瓶

3毫升

 

9. 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

订购信息

单组份订购信息

编号名称规格

G&VS80079.1细胞总胆固醇(酯酶法)菲律宾荧光染色试剂盒20

G&VS80079.1A 清理液(Reagent A     毫升

G&VS80079.1B固着液(Reagent B       毫升

G&VS80079.1C水解液(Reagent C       毫升

G&VS80079.1D 抗干扰液(Reagent D     毫升

G&VS80079.1E染色液(Reagent E       毫升

G&VS12058.2抗淬灭剂            毫升

试剂盒订购信息

 

产品编号

名称

规格

G&VS80059.1

细胞总游离胆固醇菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂盒

50

G&VS80059.2.1

特殊石蜡切片总游离胆固醇菲律宾(FILIPIN荧光间接染色试剂盒

10

G&VS80059.2.2

特殊石蜡切片总游离胆固醇菲律宾(FILIPIN荧光直接染色试剂盒

50

G&VS80059.3

冰冻切片总游离胆固醇菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂盒

50

G&VS80079.1

细胞总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂盒

20

G&VS80079.2.1

特殊石蜡切片总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光间接染色试剂盒

10

G&VS80079.2.2

特殊石蜡切片总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光直接染色试剂盒

20

G&VS80079.3

冰冻切片总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂盒

20

 

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