主要用途

 植物组织线粒体形态/活性荧光染色试剂是一种旨在通过长波长的荧光染料特异性地聚集在线粒 体，并呈现红色，用于分析和观察线粒体活性与形态以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方 法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于新鲜植物组织(例如根尖等) 线粒体的 形态观察、活性探测和定位标记。产品严格无菌， 即到即用， 活体检测， 分辨率高， 操作简捷， 性能稳定， 滞留持久。

技术背景

线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体大量存在于 代谢旺盛的细胞中， 在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。线粒体荧光探针 MitoTracker RED，是一种含有硫醇 (Thiol)氯甲基基团的荧光染料，自由通过细胞膜，选择性地聚集在线粒体。它 可以对活细胞进行直接染色， 在 580nm 波长可以清晰看到被染成红色的线状或颗粒小体的线粒体。并可以 分析线粒体膜电位，以检测线粒体活性。

产品内容

清理液(Reagent A)

固着液(Reagent B)

离析液(Reagent C)

预备液(Reagent D)

染色液(Reagent E)

产品说明书

保存方式

毫升

毫升

毫升

毫升

微升

1 份

保存 染色液(Reagent  E)在－20℃冰箱里， 避免光照；其余的保存在 4℃冰箱里； 固着液(Reagent B)和 离析液(Reagent C)具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证 6 月

用户自备

1.5 毫升离心管：用于染色液配制的容器

载玻片：用于组织置放染色

解剖针：用于植物组织解剖

培养箱：用于染色孵育

(共聚焦)荧光显微镜：用于细胞荧光分析

实验步骤

实验开始前， 将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent E) 置入冰槽里融化， 然后分别移 出 xx 微升 预备液(Reagent D) 和 xx 微升 染色液(Reagent  E) 到新的 1.5 毫升离 心管，标记为 染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。

方法一：活体染色

1 、  加上 xx 微升 清理液(Reagent A) 在载玻片上

2 、  切取新鲜植物根尖，放进载玻片上的 清理液(Reagent A) 中

3 、  用解剖针小心压碎根尖

4 、  小心移去 清理液(Reagent A)

5 、  小心加上 xx 毫升 清理液(Reagent A) 在根尖上

6 、  小心加入 xx 微升含有 预备液 (Reagent D) 和 染色液 (Reagent E) 的 染色工作液

7 、  放进 37℃培养箱里孵育 20 分钟

8 、  取出载玻片，移去染色液

9 、  小心加上 xx 毫升 清理液(Reagent A)

10、小心移去 清理液(Reagent A)

11、盖上盖玻片，用拇指小心且垂直加压

12、即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察：激发波长 579nm，散发波长 599nm  (线粒体呈现红色)

方法二：固定染色

1 ．  加上 xx 微升 清理液(Reagent A) 在载玻片上

2 ．  切取新鲜植物根尖，放进载玻片上的 清理液(Reagent A) 中

3 ．  用解剖针小心压碎根尖

4 ．  小心移去 清理液(Reagent A)

5 ．  小心加上 xx 毫升 固着液(Reagent B)

6 ．  室温下，孵育 3 小时，避免干化

7 ．  小心移去 固着液(Reagent B)

8 ．  小心加上 xx 毫升 清理液(Reagent A)

9 ．  小心移去 清理液(Reagent A)

10．小心加上 xx 毫升 离析液(Reagent C)

11．室温下孵育 5 分钟

12．小心移去 离析液(Reagent C)

13．小心加上 xx 毫升 清理液(Reagent A)

14．小心移去 清理液(Reagent A)

13、小心加上 xx 毫升 清理液(Reagent A) 在根尖上

14、小心加入 xx 微升含有 预备液 (Reagent D) 和 染色液 (Reagent E) 的 染色工作液

15、放进 37℃培养箱里孵育 20 分钟

16、取出载玻片，移去染色液

17、小心加上 xx 毫升 清理液(Reagent A)

18、小心移去 清理液(Reagent A)

19、盖上盖玻片，用拇指小心且垂直加压

20、即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察：激发波长 579nm，散发波长 599nm  (线粒体呈现红色)

注意事项

1 ．  本产品为 20 次操作

2 ．  操作时，须戴手套

3 ．  固着液(Reagent B) 和 离析液(Reagent C) 具有腐蚀性，注意操作安全

4 ．  孵育时，必须避免光照

5 ．  建议染色完成后，即刻进行荧光检测分析

6 ．  剩余的染色工作液可放进－20℃储存备用

7 ．  本产品适合活体染色和固定染色，染色剂不易洗掉，染色持久

8 ．  根据不同组织类型，调整 染色工作液的使用剂量(1：100 至 1 ：1000 容量比)，避免过度 染色

9 ．  本公司提供系列线粒体分析试剂产品

质量标准

1 ．  本产品经鉴定性能稳定

2 ．  本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后， 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系，并将该产品退回， 经检验确系产品质量所致， 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ，  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

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