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RNA荧光(RiboGreen)定量检测试剂盒产品说明书

点击次数:409次     发布时间:2022/11/17 13:20:27

主要用途RNA荧光(RiboGreen)定量检测试剂是一种旨在通过使用RiboGreen荧光染料与样品中RNA的高度结合而产生荧光信号来精确定量样品中RNA含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种分子生物学实验,例如体外转录RNA、Northern Bolt、S1核酸酶检测、RNA酶保护检测、cDNA库制备、逆转录PCR和差异显示PCR中RNA含量分析。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,高度敏感。

 

技术背景作为RNA染色剂之一的RiboGreen荧光染料与样品中RNA,包括rRNA、mRNA等结合,产生荧光信号。RiboGreen技术可以检测到低达1纳克RNA的变化。RNA的微量增加引起荧光信号强度(Intensity)或相对荧光单位(RFU)的显著增加。其自发荧光(Autofluorescence)忽略不计,重复性标准差异(Standard Deviation)低,不受样品化学成分的干扰。

 

产品内容

染色液Reagent A)  

稀释液(Reagent B)  

标准液(Reagent C)   

产品说明书       

 

保存方式保存染色液Reagent A)和标准液(Reagent C)在-20冰箱里,避免反复冻融;其余的保存在4冰箱里,染色液(Reagent A)避免光照有效保证6月

 

用户自备

1.5毫升离心管:用于样品操作的容器

200微升1厘米光径比色皿或黑色96孔板:用于荧光分析的容器

荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于荧光定量分析

 

实验步骤 

一、 测定准备

1. 准备好待测样品,置于冰槽里

2. 设定好荧光分光光度仪:激发波长485±10nm,散发波长530±12.5nm,并置零

3. 实验开始前,将-20冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent A)置于冰槽里融化。然后移出xx微稀释液(Reagent B)到新的1.5毫升离心管,加入xx微升染色液(Reagent A),混匀后,用锡纸包裹,标记为染色工作液5次测定量),放在暗室里。然后进行下列操作。

 

二、 构建标准曲线

1. 准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管

2. 分别加入xx微升稀释液(Reagent B)到每个离心管

3. 移取xx微升标准液(Reagent C)1号管,混匀

4. 小心移取xx微升1号管稀释的标准液(Reagent C)2号管,混匀

5. 小心移取xx微升2号管稀释的标准液(Reagent C)3号管,混匀

6. 小心移取xx微升3号管稀释的标准液(Reagent C)4号管,混匀

7. 1至5号管放进冰槽里备用;标准管含量见下表

管号

稀释液(Reagent B)

标准液(Reagent C)

标准DNA总量

1

xx微升

xx微升

xx纳/毫升

2

xx微升

xx微升1号管

xx纳/毫升

3

xx微升

xx微升2号管

xx纳/毫升

4

xx微升

xx微升3号管

xx纳/毫升

5

xx微升

空对照

0

8. 移取xx微升含有染色液(Reagent A)稀释液(Reagent B)染色工作液到新的比色皿

9. 加入100微升上述配制的标准液

10. 室温下,孵育5分钟,避免光照

11. 即刻放进荧光分光光度仪测读:获得相对荧光单位(Relative Fluorescence Unit;RFU)

12. 重复实验步骤8至11四次

13. 绘制标准曲线:纵座标(Y轴)为相对荧光单位(RLU);横坐标(X轴)为DNA含量(/毫升

 

三、 样品检测

1. 移取xx微升含有染色液(Reagent A)稀释液(Reagent B)染色工作液到新的比色皿

2. 加入100微升待测样品

3. 室温下,孵育5分钟,避免光照

4. 即刻放进荧光分光光度仪测读:获得相对荧光单位(Relative Fluorescence Unit;RFU)

5. 根据标准曲线获得样品对应RNA含量/毫升

 

注意事项

1. 本产品为25次操作,包括标准曲线测定

2. 整个操作须带手套,建议使用滤芯枪头,并格外小心,防止降解RNA

3. 建议所有的操作用品属于RNA专用

4. 使用新鲜配制的染色工作液,务必不要超过2小时,且注意避光

5. 孵育时,避免光照

6. 系统检测,标准曲线测定1次即可;如果仪器更换,则需要重新测定1次

7. 如果荧光读数过高,可以相应稀释样品量

8. 盐类、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白、琼脂糖不会干扰检测

9. 如果样品中含有DNA,建议使用5单位DNA酶,37孵育90分钟预处理

10. 本公司提供系列RNA检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定高度敏感

 

使用承诺极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

 

单组分订购信息

编号名称 

G&VS20129 RNA荧光(RiboGreen)定量检测试剂盒

G&VS20129A 染色液Reagent A) 

G&VS20129B 稀释液Reagent B) 

G&VS20129C标准液(Reagent C)  

 

试剂盒订购信息

产品编号

产品名称

规格

G&VS12046

DEPC水

500毫升

G&VS12047

DMDC水

500毫升

G&VS20016.1

DEPC处理试剂盒

100次

G&VS20016.2

DMDC处理试剂盒

100次

G&VS12039.1

RNA样品储存液

50毫升

G&VS12039.2

纯化RNA样品储存液

50毫升

G&VS20101

mRNA纯化树脂再生试剂盒

20次

G&VS20127

RNA比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS20129

RNA荧光(RiboGreen)定量检测试剂盒

20次

 

TEL:021-80186165  点击拨打热线