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植物精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒产品说明书

点击次数:377次     发布时间:2022/11/17 10:18:22


主要用途

植物精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂是一种旨在通过精氨酸,在碱性条件下,羟基喹啉进行反应后,由次溴酸钠作用产生的砖红色显色产物,在分光光度仪下,即采用比色法来测定样品中精氨酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改坂口方法Sakaguchi method、成功实验证明的其适用于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)、胚胎叶(cotyledon)、上胚轴(epicotyl)等裂解萃取液样品中精氨酸水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

L-精氨酸(L-arginineArgR)学名为2-氨基-5-胍基戊酸 L-蛋白氨基酸 (S)-2-Amino-5-guanidino pentanoic acid,是一种必需α-氨基酸,属于谷氨酰胺家属,分子式是C6H14N4O2,分子量174.20,编码为CGUCGCCGACGGAGAAGG其作用在于合成蛋白质,激发免疫系统,增强一氧化氮产生,促进生长激素、胰岛素等释放。精氨酸在人体内产生,也存在于各种鱼类、红肉、禽类、豆类、全麦、乳制品、葡萄等食物中。具有舒张血管,愈合伤口,治疗心绞痛和阳痿等功能。葡萄酒工业中,精氨酸水平用于监测和控制氨基甲酸乙酯的水平。精氨酸缺陷,将导致早产、高氨血症、心肺和神经功能异常等。基于精氨酸,在碱性条件下,与羟基喹啉(8-hydroxyquinoline进行反应,由次酸钠(sodium hypobromite)作用,产生显色产物,呈现红色,通过分光光度仪(500nm波长)来定量分析精氨酸的含量。

 

产品内容

清理液(Reagent A100毫升

裂解液(Reagent B 50毫升

反应液(Reagent C  15毫升

碱性液(Reagent D 15毫升

显色液(Reagent E  30毫升

标准液(Reagent F 10毫升

产品说明书       1

 

保存方式

保存反应液(Reagent C)、显色液(Reagent E)和标准液(Reagent F20冰箱里;其余的保存4冰箱里试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6

 

用户自备

15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器

DOUNCE匀浆器:用于裂解组织

涡旋震荡仪:用于混匀反应物

台式离心机:用于样品操作

比色皿:用于比色的容器

分光光度仪:用于比色分析

 

实验步骤  

一、样品预处理

1. 准备好新鲜的植物组织(叶片、谷粒、种子等),并秤重以确定100500毫克组织重量 

2. (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管

3. (选择步骤)加入3毫升清理液(Reagent A清洗1

4. 即刻用刀片切碎组织

5. 放进一个预冷的15毫升锥形离心管

6. 加入预冷的2.5裂解液Reagent B

7. 涡旋震荡5秒,充分混匀

8. 即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约80下)

9. 将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管,放进4台式离心机离心10分钟,速度10000g 

10. 小心移出上清液新的15毫升锥形离心管

11. 移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-G&VS30030.1

12. 放进冰槽里备用或放入70冰箱里保存

 

二、 测定准备

1. 设定好分光光度仪(温度为4℃):波长500nm,并置零 

2. 准备好515毫升锥形离心管,标记为15号管

3. 分别加入5预冷的清理液(Reagent A到每个离心管

4. 移取5预冷的标准液(Reagent F1号管,混匀

5. 小心移取51号管稀释的标准液(Reagent F2号管,混匀

6. 小心移取52号管稀释的标准液(Reagent F3号管,混匀

7. 小心移取53号管稀释的标准液(Reagent F4号管,混匀

8. 15号管放进冰槽里备用;标准管浓度见下表

管号

清理液(Reagent A

标准液(Reagent F

标准精氨酸含量

1

5毫升

5

50微克/毫升

2

5

51号管

25微克/毫升

3

5

52号管

12.5微克/毫升

4

5

53号管

6.25微克/毫升

5

5

空对照

0

 

三、 标准曲线测定

1. 移取2.5上述制备的标准液(Reagent F新的15毫升锥形离心管

2. 加入500微升反应液(Reagent C,混匀

3. 加入500微升碱性液(Reagent D,混匀

4. 置于冰槽里孵育10分钟

5. 加入1毫升冰槽里预冷的显色液(Reagent E

6. 快速枪头混匀(注意:显示砖红色)

7. 即刻移取3毫升到预冷的比色皿

8. 即刻放进分光光度仪检测500nm波长),获得吸光读数OD)(注意:须在10秒之内测读)

9. 重复实验步骤18四次

10. 实际吸光读数标准样吸光读数-5号管标准样吸光读数(作为空对照)

11. 构建标准曲线:纵座标(Y轴)为实际吸光读数OD);横座标(X轴)为标准精氨酸含量微克/毫升

 

四、 样品测定

1. 移取2.5上述制备的待测样品新的15毫升锥形离心管

2. 加入500微升反应液(Reagent C,混匀

3. 加入500微升碱性液(Reagent D,混匀

4. 置于冰槽里孵育10分钟

5. 加入1毫升冰槽里预冷的显色液(Reagent E

6. 快速枪头混匀(注意:显示砖红色)

7. 即刻移取3毫升到预冷的比色皿

8. 即刻放进分光光度仪检测500nm波长),获得吸光读数OD)(注意:须在10秒之内测读)

9. 实际吸光读数样品吸光读数-5号管标准样吸光读数(作为空对照)

10. 根据标准曲线获得样品对应精氨酸含量微克/毫升)

 

五、 计算样品实际含量

 根据标准曲线获得样品对应精氨酸含量(微克/毫升)X样品稀释倍数X2.5(样品总量;毫升)=微克(微克/100500毫克组织)

 

注意事项

1. 本产品为20次操作

2. 本产品检测范围050微克

3. 操作时,须戴手套

4. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全

5. 整个操作须在冰上操作

6. 样品测定避免批量一次操作,尤其是加入显色液(Reagent E

7. 系统操作过程中,标准样品测定只需1

8. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品量

9. 用户可以使用:微克精氨酸/毫克蛋白或微克精氨酸/毫克组织等

10. 本公司提供系列生化学检测试剂产品

 

质量标准

 

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

极威生物秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

 

单组分订购信息

 

编号     名称规格

G&VS19012.6     植物精氨酸含量化学比色法定量检测试剂盒     20

G&VS19012.6A     清理液Reagent A100毫升

G&VS19012.6B     裂解液(Reagent B   100毫升

G&VS19012.6C     反应液Reagent C50毫升

G&VS19012.6D     碱性液(Reagent D   50毫升

G&VS19012.6E 显色液(Reagent E         50毫升

G&VS19012.6F 标准液(Reagent F     20毫升

 

试剂盒订购信息

 

产品编号

名称

规格

G&VS19012.1

通用型精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19012.2

细胞精氨酸(arginine))含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19012.3

组织精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19012.4

血液精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19012.5

体液精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19012.6

植物精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19012.7

酒类精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19012.8

饮料精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.1

通用型精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.2

细胞精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.3

组织精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.4

血液精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.5

体液精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.6

植物精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.7

酒类精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19229.8

饮料精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.1

通用型精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.2

细胞精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.3

组织精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.4

血液精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.5

体液精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.6

植物精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.7

酒类精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

G&VS19230.8

饮料精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

20

 

 

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