根据血清等级可分为标准血清,优等血清,间充质干细胞血清
标准血清:
检测项目及方法 | 标准要求 |
外观检查:目测法 | 浅黄色澄清稍粘稠的液体,无溶血或异物 |
pH:pH计 | 7.00~8.00 |
蛋白质含量 %(g/ml) : Lowry法 | 3.0~4.5 |
细菌内毒素(Eu/ml):凝胶法 | <10 |
血红蛋白含量(mg/dl):分光光度法 | <30 |
渗透压摩尔浓度 (mOsmol/kg):冰点法 | 280~360 |
无菌检查: 薄膜过滤法---细菌、真菌(美国药典) | 阴性 |
支原体:培养法及DNA荧光染色法 | 阴性 |
病毒检测(9CFR 113.53) | 均为阴性 |
细胞培养法:致细胞病变因子、致红细胞吸附因子 | 均为阴性 |
牛免疫球蛋白IgG含量 | <500mg/L |
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优等血清:
检测项目及方法 | 标准要求 |
外观检查:目测法 | 浅黄色澄清稍粘稠的液体,无溶血或异物 |
pH:pH计 | 7.00~8.00 |
蛋白质含量 %(g/ml) : Lowry法 | 3.0~4.5 |
细菌内毒素(Eu/ml):凝胶法 | <10 |
血红蛋白含量(mg/dl):分光光度法 | <30 |
渗透压摩尔浓度 (mOsmol/kg):冰点法 | 280~360 |
无菌检查: 薄膜过滤法---细菌、真菌(美国药典) | 阴性 |
支原体:培养法及DNA荧光染色法 | 阴性 |
病毒检测(9CFR 113.53) 荧光抗体法:牛病毒性腹泻病毒、牛腺病毒、牛细小病毒、呼肠孤病毒、狂犬病毒、 牛副流感病毒3型、蓝舌病毒、牛呼吸道合胞体病毒 | 均为阴性 |
细胞培养法:致细胞病变因子、致红细胞吸附因子 | 均为阴性 |
牛免疫球蛋白IgG含量 | <500mg/L |
能用该级别血清培养的细胞种类 | 间充质干细胞、绝大多数常用的原代细胞(淋巴细胞、内皮细胞、肌肉细胞、成纤维细胞、神经细胞)、基因改造细胞(杂交瘤细胞)、肿瘤细胞、异倍体细胞。 |
间充质干细胞专用血清:
A、间充质干细胞对内毒素以及培养体系非常敏感,培养时严重依赖血清的质量
B、血清中的一些生长因子类的成分,会诱导MSC分化,妨碍后续实验
不同批次的血清间存在差异,因此要对血清进行筛查,选择不会诱导MSC分化的批次用于MSC培养。
筛选间充质干细胞优选血清时使用了多个批次的澳洲胎牛血清进行平行对照试验,这些批次的血清都具有如下特点
1、内毒素低,避免细胞过早凋亡
2、血源来源于经过澳洲DAFF和中国动植检认可的澳洲牧场,确保不受疯牛病、牛腹泻病毒影响
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