CAT#:220539-30
低温运输、-20℃保存

单细胞全基因组扩增试剂盒（MDA法）

产品及特点
本产品是基于MDA技术的、用于从单细胞（或数个细胞）中制备和扩增全基因组的试剂盒。本产品有下列特点：
1．即开即用，不需要单独准备和优化所需试剂。
2．可以扩增单个细胞的基因组达上万倍。
3．具有全基因组扩增的所有特点，包括高产量和高保真性。
4．可使用各种来源的样品，包括培养细胞和胚胎细胞等。
5．产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片端PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析（片段差异，微卫星差异、SNP、STR）等。
6．本产品足够30次微量扩增。

规格及成分
本产品采用五孔盒包装
成份                                               编号         规格        包装材料
单细胞裂解液A                            220539a    100μL     0.5 mL本色盖
单细胞裂解液B                            220539b    100μL     0.5 mL白盖管
2×单细胞专用MDA MasterMix    220539c     0.3 mL    0.5 mL绿盖管
Phi 29 DNA聚合酶（10U/μL）    220539d    15 μL      0.5 mL红盖管
使用手册                                      220539sc    1份           无

自备试剂
超纯水

运输及保存
低温运输、-20℃保存, 有效期一年。

使用方法
1、将细胞悬浮在自备的PBS缓冲液或其他合适的缓冲液中，在显微镜下用毛细管转移单个细胞（或数个细胞，总体积不超过2.5 uL）到含有2.5 μL单细胞裂解液A的0.2 mL PCR管中，室温放置2分钟。如果使用纯化好的来源于单细胞的DNA溶液，则直接将2.5μL的DNA溶液和2.5μL的单细胞裂解液A混合，室温放置2分钟。
2、加入5 μL单细胞裂解液B，95℃保温5分钟，室温短暂离心半分钟。
3、然后冰上放置5-10分钟。
4、加入10μL 2×单细胞专用MDA MasterMix，轻柔吹打混合均匀。
5、加入0.5μL Phi 29 DNA聚合酶（10 U/μL），轻柔吹打混合均匀。
6、30℃保温12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温（注意：不是37℃）并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，必须在样品管中加入50μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
7、65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
8、立即取3-5 μL反应液进行电泳检测扩增效果。注意：反应液中不含有甘油和电泳染料，所以需要先加上样缓冲液，电泳需要用核酸染料。
9、扩增的DNA可以用于后续试验或-20℃长期保存。。

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