CAT#:JW-11-230745
低温运输,-20℃保存
细胞脂质尼罗红染色试剂盒
产品及特点
脂质是一种低极性(疏水性)的天然大分子混合物,包括脂肪酸及其衍生甘油酯和磷脂,以及固醇类物质,例如胆固醇。细胞浆脂滴的形成是正常细胞生理过程,脂滴由中性脂质构成,通常为甘油三酯脂滴,为能量储备;少部分为胆固醇酯脂滴,作为过多细胞胆固醇的存储。尼罗红(Nile red)染色剂是一种亲脂性的恶嗪类黄光染料,与腊酯、甘油三酯以及各种脂肪酸等脂类物质结合后,在激发波长543nm的激发下,显示强烈橘黄色荧光(发射波长598m)。同时在紫外光的照射下显示红色。本试剂盒就是基于上述原理对细胞脂质进行染色的试剂盒,它具有下列特点:
1.即开即用,操作简捷,性能稳定,着色清晰。
2.用于各种人体和动物细胞样本的成脂细胞定性、细胞病理学分析和识别研究。
3.本产品既可用于冰冻切片染色,也可用于培养皿或六孔板里的贴壁细胞染色。
4.本产品足够100次滴染法细胞脂质尼罗红染色。
5.本产品只可用于科研。
规格及成分
成分 编号 规格 包装
细胞脂质尼罗红染色试剂A 11-230745a 50 mL 60 mL棕色瓶
细胞脂质尼罗红染色试剂B 11-230745b 0.2 mL 0.5 mL棕色管
细胞脂质尼罗红染色试剂C 11-230745c 40 mL 60 mL本色瓶
使用手册 11-230745sc 1份 无
本产品采用小扁盒包装
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限为1年,避免光照。
自备物品
1×PBS,1.5 mL离心管,荧光显微镜。
使用方法
一、细胞脂质尼罗红染色工作液的配制
1.实验开始前,取出细胞脂质尼罗红染色试剂B和C室温放置使其融化,按B:C=1:200的比例配制染色工作液,避光操作且必须现配现用,在1小时内使用完毕。
二、冰冻切片染色
2.取出待测的冰冻切片,复温3分钟。
3.向切片上滴加细胞脂质尼罗红染色试剂A,铺满整个切片,室温固定15-20分钟。1×PBS洗3次,每次1分钟。
4.向切片上滴加细胞脂质尼罗红染色工作液,室温避光孵育10分钟。
5.1×PBS清洗切片1-2次,每次30秒,至无红色染料脱出。
6.加上盖玻片制备临时切片或使用S2100-抗荧光衰减封片剂封片,然后在荧光显微镜下观察:激发波长543nm,发射波长598nm(脂滴着色)和紫外光(核着色)。
三、贴壁细胞染色
7.小心吸除培养皿或六孔板里的培养液。
8.小心加入1mL 1×PBS,温柔清洗细胞表面,重复1-2次每次30秒。
9.小心吸除培养皿或六孔板里的清洗液。
10.加入1mL细胞脂质尼罗红染色试剂A,覆盖细胞表面,固定10-15分钟。小心吸除固定液。
11.加入1mL 1×PBS,清洗细胞表面,重复1-2次。小心吸除清洗液。
12.加入适量细胞脂质尼罗红染色工作液,室温避光孵育10分钟,小心吸除细胞脂质尼罗红染色工作液。
13.小心加入1mL 1×PBS,摇晃清洗细胞表面30-60秒,重复1-2次。
14.最后一次清洗液不弃去,注意避光保存并在30分钟内用荧光显微镜下观察:激发波长543nnm,发射波长598nm(脂滴着色)和紫外光(核着色)。
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