CAT#:JW-11-220849
常温运输保存(避光)
电泳级耐热型SYBR染料
产品及特点
本产品是改良型的SYBR Green I,它跟常规的SYBR Green I相比检测灵敏度相当,但具有耐热、耐水解的特点,所以十分稳定,使用更加方便。
1.稳定,本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上,方便运输和保存。本产品的1X工作液在常温下的半衰期为120多天,比常规的SYBR Green I(5天)长20倍以上。
2.使用方便多样,既可以在制备凝胶时加入到融化的琼脂糖凝胶中,还可以象常规的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar一样用于电泳后染色。
3.灵敏,其检测灵敏度跟SYBR Green I相同,比EB灵敏200-100倍。
4.低毒、环保、健康。
5.可检测各种核酸分子,包括dsDNA、ssDNA、RNA和Oligo。
6.兼容性好,不但与常用的TAE、TBE等兼容,还与常用的UV检测系统和可见光激发检测系统兼容。
7.对DNA泳动速度的影响小于常规的SYBR Green I。
8.半衰期长,自然损耗低,可多次使用,使其相对使用成本比常规的SYBR Green I和其它非对称花青类染料低。
规格及成分
成份 编号 规格 包装
电泳级耐热型SYBR染料 11-220849 50 μL 0.5ml棕色管
使用手册 11-220849sc 1份 无
本产品使用塑料袋包装
运输及保存
常温运输保存(避光),保存期为一年。
自备物品
电泳试剂
使用方法
本产品可以在电泳中染色,优点是用量少,但如果与DNA的比例没达到最佳时,带型容易弥散;也可以在电泳后染色,优点是不会对DNA电泳产生干扰,但用量大,还需要额外的染色过程。客户可以根据需要选择使用方法。本公司不建议将本产品用于染色后再上样(即先将其与DNA混合然后再上样),也不建议将其用于PAGE(因分子较大,难以进入凝胶)。
使用方法之一:电泳中染色(仅适于琼脂糖凝胶电泳)
1.按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。
2.将按1:10000的比例将本产品直接加到熔化的琼脂糖凝胶中并充分摇晃均匀(5 μL可以加入到50 mL熔化的琼脂糖凝胶中),然后倒胶。
3.其余的上样、电泳、UV观察等步骤按常规操作进行。在254 nm紫外照射透视下,与双链DNA接合的本产品呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用300 nm紫外照射透视仪观察也可以,但效果不如254 nm。
4.未用完的胶可以反复融化,如果保存时间在一周以上,最好闭光。
5.注意:本方法的灵敏度比在熔化的琼脂糖凝胶中加EB染色的方法高,比电泳后染色经济(后者用量大)。本产品与DNA结合同SYBR Green I跟DNA的结合一样,有时会影响DNA样品的相对迁移率。如果出现DNA电泳带弥散的现象,说明本产品和DNA的比例没达到最佳,可以适当调节DNA的上样量。
使用方法之二:电泳后染色
6.按照常规方法进行电泳。
7.用水将10000×本产品原液稀释2500倍成4×工作液(如:将5 μL 本产品原液加到10 mL水和2.5 mL 5 M NaCl中,加NaCl的目的是促进本产品与DNA的结合)。由于本产品对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲和力,故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
8.将电泳后染色工作液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。
9.在254 nm紫外照射透视下,与双链DNA接合的本产品呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用300 nm紫外照射透视仪观察也可以,但效果不如254 nm。
注意:电泳后染色工作液可以冷冻避光储存,可以在一个星期内重复使用多次。
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