CAT#:JW-11-220962
低温运输，-20℃避光保存

细胞活力快速检测试剂盒（ATP发光法）

产品及特点
本产业用于检测培养细胞中活细胞数目，其原理是温和裂解细胞，释放出细胞内的ATP，ATP再与裂解液中的底物反应，发出光信号。光信号的强弱与ATP量成正比，而ATP含量又与细胞数量成正比，进而推导出活细胞的数量。其原理图如下：

本产品有以下特点：
1.即开即用，用户不用单独准备各种试剂。
2.本产品的发光信号半衰期超过5小时，故误差小。
3.可手动，也可以自动操作。
4.可以但样品检测，也可以多孔板检测。
5.裂解和检测一步完成，免去离心、洗涤等操作。
6.灵敏度高，可检测到的每个孔内的细胞数最低为15个。
7.本试剂盒足够500次细胞活力检测。
8.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品使用塑料袋包装
成份                                        编号        规格           包装
细胞活力快速检测液    11-220962        13 mL    15 mL棕色瓶
使用手册                     11-220962sc      1份            无

运输及保存
低温运输，-20℃避光保存

自备物品
低速离心机 、荧光闪烁计数仪、平板摇床、微量移液器、不透明壁多孔板，用于细胞培养物

使用方法
1.在一块壁不透明的多孔板上准备好用培养基重悬的待测哺乳动物细胞。如果是96孔板，每孔加100μL。如果是384 孔板，每孔加25μL。其中还要设置只含培养基不含细胞的阴性对照孔，加入的体积同上。
2.在样品孔中加入待测的、对细胞活性可能有影响的化合物，按相应的条件进行孵育。
3.将多孔板放室温30分钟。
4.向每孔中加入与细胞培养基体积相等的细胞活力快速检测液。如果是96孔板，加100μL细胞活力快速检测液。如果是384 孔板，每孔加25μL。
5.在一个定轨振荡器上摇晃2分钟以让细胞裂解。
6.将多孔板放室温10分钟，使光信号稳定。注意：温度梯度，细胞分布不均匀和孔的边际效应可能导致不稳定的光信号值。
7.记录发光信号，数据读取时间一般情况下可以设置为0.25-1秒，但具体需要根据仪器使用手册调整，仪器不同可能稍有不同。
8.根据光信号强弱即可计算待测化合物，或不同条件对细胞活力的影响。如果需要测定ATP的绝对浓度，则需要用自备ATP溶液按下述操作绘制标准曲线。

附：绘制ATP 标准曲线（测定样本ATP浓度时才需要做标准曲线）
9.用培养基和自备的ATP母液配制 1μM ATP溶液。
10.用培养基对上步所得ATP溶液进行10倍系列稀释，得到1μM 到10nM 6个浓度梯度。
11.将每个浓度梯度的样品各100μL加入到多孔板中。注意：由于血清中存在的ATP酶可以降解ATP，因此溶液配好后应立即进入下步操作。
12.在每孔中加入100μL的细胞活力快速检测液。
13.在振荡器上混合2分钟。
14.室温孵育10分钟，稳定光信号。
15.记录发光值。
16.绘制标准曲线。
17.根据标准曲线和样本的数据推导出样品中ATP的浓度。

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