CAT#:JW-11-230317
低温运输，-20℃保存

细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品及特点
细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒，简称CCK-8（Cell Counting Kit-8）试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下，可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜（Formazan）。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

规格及成分
成分                                                    编号        规格            包装
细胞增殖及细胞毒性检测溶液    11-230317      100次    1 mL本色管
使用手册                                   11-230317sc    1份            无
本产品采用塑料袋包装

运输及保存
低温运输，-20℃保存，有效期12个月，避免反复冻融。

自备试剂
96孔板，酶标仪，420-480 nm的滤光片

使用方法
一、胞增殖及细胞毒性实验
1.在96孔板中接种细胞悬液（100 mL/孔），通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞，细胞毒性实验每孔约5000个细胞。具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素决定。
2.按照实验需要，进行培养并给予0-10 mL特定的药物刺激，处理一段适当的时间（例如:6，12，24或48小时）。
3.每孔加入10 mL 细胞增殖及细胞毒性检测溶液。如果起始的培养体积为200 mL，则需加入20 mL 细胞增殖及细胞毒性检测溶液，以此类推。可以用加相应量细胞培养基和细胞增殖及细胞毒性检测溶液但不加细胞的孔作为空白对照，若担心所使用的药物会干扰检测，可以设置加相应量细胞培养液、药物和细胞增殖及细胞毒性检测溶液不加细胞的孔作为空白对照。
4.在细胞培养箱内继续孵育1-4小时，具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5，1，2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。注意：使用酶标仪前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
5.用酶标仪测定在450 nm处的吸光值，若无450 nm滤光片，可以使用420-480 nm的滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液，可以使用大于600 nm的波长，例如650 nm，作为参考波长进行双波长测定。
6.如果需要暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 mL 0.1M HCl溶液或者1% w/v的SDS溶液，避光保存在室温，24小时内吸光度不会发生变化。

二、实验结果分析
7.细胞活力 = [OD(加药) - OD(空白)] / [OD(0 加药) - OD(空白)] × 100%。
8.抑制率 = [OD(0 加药) - OD(加药)] / [OD(0 加药) - OD(空白)] × 100%。
9.OD(加药)：具有细胞、培养基、CCK-8 溶液和药物溶液的孔的吸光值。
10.OD(空白)：具有培养基、细胞增殖及细胞毒性检测溶液，没有细胞的孔的吸光值。
11.OD(0 加药)：具有细胞、培养基、细胞增殖及细胞毒性检测溶液，没有药物溶液的孔的吸光值。

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