CAT#:JW-11-220724
低温运输,-20℃保存
Taq DNA聚合酶,5U/μL
产品及特点
本产品是Thermus aquaticus(水生栖热菌)的DNA聚合酶基因在E. coli中表达而得,具有以双链DNA为模板的5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个氨基酸,分子量为94 Kda。该酶可以广泛用于PCR,RT-PCR,加尾反应等。它具有如下特点:
1.耐热DNA聚合活性,该酶在90℃以上几乎无DNA合成,在75~80℃时延伸率约150个核苷酸,70℃时为60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒。在65~68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2.热稳定,在PCR混合物中95℃保温40分钟仍可保持50%的活性。
3.Mg2+离子依赖性,MgCl2浓度在2.0 mM时该酶催化活性最高。
4.本酶无3'→5'外切活性,不具3'→5'校对功能,碱基错配机率为2.1×10E4。
5.本产品足够200次50μL体系的PCR反应。
6.本产品只可用于科研。
规格及成分
成份 编号 规格 包装
Taq DNA聚合酶,5U/μL 11-220724a 500 U 1.5 mL本色管
10×PCR Buffer(含Mg2+) 11-220724b 1 mL 1.5 mL白盖管
使用手册 11-220724sc 1份 无
本产品采用塑料袋包装
运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期为12个月。
自备物品
待测样本及实验所需试剂。
使用方法
以λ DNA为模板进行PCR实验为例
1.按下列组分配置PCR反应液。
成分 加样量(μL)
Taq DNA聚合酶,5U/μL 0.25
10×PCR Buffer(含Mg2+) 5
自备dNTP,各2.5mM 4
模板DNA 参照模板DNA推荐用量表
引物1,20μM 1
引物2,20μM 1
补超纯水至 50
50μL反应体系中模板DNA推荐用量如下表:
模板DNA类型 加样量
哺乳动物基因组DNA 0.5-1 μg
酵母基因组DNA 5-500 ng
细菌基因组DNA 0.5-50 ng
质粒DNA 5-500 pg
PCR回收片段 1-100 pg
2.盖上盖子后上机,以λ DNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
过程 温度 时间
PCR反应
(30-35个循环) 94℃ 30 秒
55℃ 30 秒
72℃ 1 分钟
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
3.PCR扩增得到的产物可用于后续实验,具体方法根据相关流程操作即可。
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