CAT#:JW-7-11039
常温运输和保存

γ-谷氨酰转移酶活性测定试剂盒（410nm分光光度连续监测法）

产品及特点
γ-谷氨酰转移酶（γ-Glutamyl Transferase，γ-GT，GGT，EC 2.3.2.2）是细胞内谷氨酸循环系统的重要酶之一，其功能是催化谷胱甘肽的分解，调节细胞内谷胱甘肽的含量。具体步骤是将谷胱甘肽上γ-谷氨酰基转移至另一个肽或氨基酸上。它是一种含巯基的线粒体酶，组织分布以肾含量最多，其次为胰、肺、肝等。正常人血清中的GGT则主要来自肝胆，红细胞中几乎无GGT，当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时，血清中GGT升高。因此，GGT可用于鉴别肝脏系统的疾病。
实验室测定GGT方法之一是利用它能催化γ-谷氨酰基从含γ谷氨酰基的硝基苯胺转移到双甘肽上，产生在410nm有光吸收的黄色化合物，在410nm吸光度增高的速率与GGT活性呈正比关系，故可以对GGT活性进行测定。
本产品基于上述原理开发，它的特点如下：
1.即开即用，用户不用单独准备各种试剂。
2.操作简单，加入样品到3mL比色皿中之后直接进行5分钟即可。
3.本试剂盒足够至少100个样品的测定，每次可以测定0.2mL血清（血浆）或者组织匀浆上清液。
4.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品使用小扁盒包装
成份                                    编号                       规格      包装材料
GGT活性测定溶剂                7-10039a        40mL×5     60mL本色瓶
GGT活性测定底物成分1    7-10039b1       1g×5            1.5mL棕色管
GGT活性测定底物成分2    7-10039b2        0.1g×5      1.5mL本色管
使用手册                            7-10039sc        1份                    无

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。

自备物品
去离子水、控温分光光度计，3mL比色皿、待测样本（血清、血浆或组织匀浆液上清）。

使用方法
1.新鲜配制GGT活性测定底物工作液
将1管GGT活性测定底物成分1 和1管GGT活性测定底物成分2倒入到1瓶GGT活性测定溶剂中，颠倒摇晃均匀溶解，得到GGT活性测定底物工作液40mL，足够测定20个样品使用。
注意：为了避免有残留粉末没有倒出，需要用移液枪加入底物溶液冲洗管子内部。此溶液4℃可以放5天，常温可以放2天。超过此时间请勿用。
2.在比色皿中加入如下成分：
成份                                    对照1个       样品N个
GGT活性测定底物工作液    1.8mL       各1.8mL
待测样品                                   -            各0.2mL
自备样品缓冲液                        0.2mL     -
注意：如果样本是组织匀浆液上清，需要测其总蛋白浓度，本试剂盒不提供相关试剂。
3.放入控温分光光度计，30℃预热1分钟。
4.实时测定410nm的吸光度变化，共5分钟。
5.计算线性速率（DA/min），每个时间点的A值需要扣除对照样的A值。
6.计算活性。如果样品是血清血浆，GGT活性（U/L）=（DA/min）×（1/9500）×10E6×（1.8+0.2）/0.2。9500为底物的摩尔消光系数，10E6是将底物浓度从M换算到uM的倍数。
7.如果样品是组织匀浆液上清，GGT活性（U/L）=（DA/min）×（1/9500）×10E6/待测样本总蛋白浓度（单位为g/L）。

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