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羧肽酶A活性测定试剂盒(255 nm分光光度法)

点击次数:15次     发布时间:2025/12/22 10:08:09

CAT#:JW-7-EC3.4.17.1-255
常温运输及保存,有低温成分

羧肽酶A活性测定试剂盒(255 nm分光光度法)

产品及特点
本产品是使用紫外分光光度法检测羧肽酶A活性的检测试剂盒,适用于所有包含羧肽酶A的产品,包括但不限于牛胰腺来源羧肽酶A的酶活测定。本产品羧肽酶A活性测定原理为:羧肽酶A水解底物溶液,使溶液在255 nm处吸光度值发生变化,以255 nm处吸光度值的变化计算羧肽酶A的酶活。本产品具有如下特点:
1.使用便捷,用户只需准备待测样本。
2.本试剂盒1个羧肽酶A活性单位的定义是在25℃ pH7.5的条件下,每分钟能催化1 mg底物所需的酶量为1个酶活性单位。
3.待测样本中不得有其它羧肽酶的污染。
4.本产品足够100次羧肽酶A活性测定实验。
5.本产品只可用于科研。

规格及成分
成份    
                                    编号                    规格            包装
羧肽酶A底物干粉          7-EC3.4.17.1-255a      95 mg   
        5 mL棕玻瓶
10×羧肽酶A底物干粉
稀释液       
                    7-EC3.4.17.1-255b    150 mL×2    250 mL本色瓶
羧肽酶A样本稀释液       7-EC3.4.17.1-255c    20 mL  
          30 mL本色瓶
使用手册      
                  7-EC3.4.17.1-255sc    1份                无
本产品采用小扁盒包装

运输及保存
常温运输及保存,羧肽酶A底物干粉-20℃保存,有效期一年。

自备试剂
待测样品,超纯水,比色皿,紫外分光光度计。

使用方法
1.实验前将羧肽A样本稀释液放置于冰上预冷。
2.配置羧肽酶A底物溶液:将羧肽酶A底物干粉加29 mL10×羧肽酶A底物干粉稀释液,再加水至290ml总体积,使羧肽酶A底物干粉充分溶解混匀,制备成底物溶液工作液。每次使用后需置于-20ºC条件下避光保存。
3.将待测样本用预冷的羧肽A样本稀释液稀释成适当浓度。
4.在25℃恒温条件下按下表进行加样,总体系为3 mL:
步骤           
                                空白对照(mL)    N个样品(mL)
底物溶液工作液          
                          2.9                           2.9
羧肽酶A样本稀释液        
                     0.1                           -
迅速加入待测酶液,立即混匀并计时    -   
                        0.1
5.将紫外分光光度计波长选择在255 nm处,使用自备的超纯水进行校正,使吸光度值在0点。
6.用光径为1cm的比色皿测定样本及空白对照的吸光度值,每30秒读取一次各管吸光度值(A),读取3分钟。
7.以A对时间作图,取反应最初线性部分,计算每分钟吸光度值A的增加值
(ΔA/分钟)为ΔA255nm/分钟=ΔA样品/分钟-ΔA空白/分钟。
8.羧肽酶A活性计算方法:
单位/mg=ΔA255nm/分钟÷(0.30×mg酶/mL反应混合液)
羧肽酶A底物溶液在255nm处的克分子消光系数为0.3×10E6。

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