CAT#:JW-990402-50
常温运输和保存

蛋白胶微量回收试剂盒

产品及特点
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electropheresis, SDS-PAGE）不仅可用于检测蛋白质的
相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的微量蛋白胶回收法，它具有下列特点：
1.简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。
2.适用于变性胶（SDS-PAGE）和非变性胶。
3.回收率一般在50-90%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。
4.跟后续的实验兼容，包括2-D电泳、质谱测序等。
5.本产品足够使用50次。
6.本产品只可用于科研。

规格及成分
成份                                    编号      规格        包装
蛋白胶微量纯化溶液A    990402a    10mL    10mL本色瓶
蛋白胶微量纯化溶液B    990402b    50mL    60mL本色瓶
专用研磨杵                     990402c    50只     塑料袋
使用手册                        990402sc    1份       无
本品采用小扁盒包装

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂
无

使用方法
1.按常规方法进行变性（SDS-PAGE）或非变性蛋白电泳。
2.切取含目的蛋白的胶（尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
3.将切下的胶块转移到1.5mL塑料离心管中。
4.用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5.加入200uL蛋白胶微量纯化溶液A，4℃摇晃洗脱至少2-16小时（过夜）。
此时最好将蛋白胶微量纯化溶液B放在冰箱预冷。
6.10,000g离心10分钟，转移上清到新的离心管中，注意不要吸取碎胶。
7.加入5倍体积的预冷的蛋白胶微量纯化溶液B，摇晃混匀。
8.-20℃放置至少10-30分钟。
9.室温12,000g离心5-20分钟，弃上清。
10.室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的
缓冲液中，可用于后续实验（2-D电泳、质谱测序等）。

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