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固相RNase清除剂

点击次数:6次     发布时间:2025/11/24 19:22:27

CAT#:JW-903090-250
常温运输和保存

固相RNase清除剂

产品及特点
固相RNase清除剂是一种特殊的RNase快速灭活剂。它具有下列特点:
1.含有多种RNase灭活成分,保障RNA工作环境的清洁。
2.高效。本产品原液能在5分钟内将固体表面的多达100 ug的RNase彻底灭活,效力和速度远远高于常用的DEPC。
3.还能灭活包括RNase T1、 RNase H、BAL31、S1、Mung bean nuclease DNase在内的各种核酸酶。
4.无毒。跟强致癌的DEPC不同,本产品对人体没有任何毒害。
5.使用简单。处理后不需要高压灭菌。

规格及成分
本产品采用大立盒包装
成份       
                       编号        规格           包装
固相RNase清除剂   
    903090    250 mL    250 mL本色瓶
使用手册       
            903090sc    1份          

运输及保存
常温运输和保存,有效期两年

自备试剂
蒸馏水

使用方法
水的处理
直接将固相RNase清除剂原液按1:1000的比例加入到需要处理的水中,混合均匀后室温放置24小时即可直接使用,得到的水可以配制电泳溶液和裂解液。但如果对于溶解RNA的水,不建议用本产品处理,建议改用液相RNase清除剂处理。

工作平台的清洁:
直接将固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液喷于台面,5分钟后用普通吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。
注意:由于一般的工作平台RNase污染都很严重,本公司建议使用固相RNase清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。

实验仪器的清洁:
用浸有固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。用固相RNase 清除剂原液处理金属器械的时间不能超过5分钟。

注意:由于一般的实验仪器RNase污染都很严重,本公司建议使用固相RNase 清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。
玻璃和塑料器皿的清洁:
将器皿浸泡在固相RNase 清除剂的10或100倍的新鲜稀释液中,静置处理5分钟后取出,再用固相RNase清除剂1000倍或10000倍新鲜稀释液浸泡二次以上,倒立晾干后备用。
注意:由于一般的清洗后的玻璃和塑料器皿的RNase污染都比较严重(但一般比工作平台和实验仪器干净),本公司建议第一次浸泡使用固相RNase 清除剂的10倍或100倍新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于1000倍的稀释液。

移液枪的清洁:
根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端,留下接口塞和圈套后将其浸放在固相RNase清除剂的10或100倍的新鲜稀释液中一分钟,再用固相RNase清除剂1000倍或10000倍新鲜稀释液彻底冲洗后,晾干,装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁:
将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在固相RNase清除剂的1000倍的新鲜稀释液中5分钟以上(最好不要有气泡), 然后再用固相RNase清除剂1000倍或10000倍的新鲜稀释液充分浸泡两次,试管或离心管可立即使用或干燥后备用。

技术资料
如何检测本产品灭活RNase的效果
在两个1.5mL塑料离心管中分别加入RNase溶液,使RNase总量在10-100 ug之间,自然晾干(需要一天左右)或加热使水份蒸发,一个样品加入1 mL 本产品原液,另一个样品加入1 mL无RNase的水(对照),室温静置五分钟(注意不要让管壁上产生气泡,因为它会阻挡溶液与管壁上RNase分子的结合),然后小心吸出溶液并加入1 mL水,静置1分钟后小心吸出,重复水洗步骤一次,最后加入2.5 ug总RNA样品, 37℃保温30分钟后加RNA电泳上样液,电泳观察RNA分子的完整性。完整的RNA表示该管中RNase已经被灭活。
固相RNase 清除剂稀释度与RNase的灭活效果的关系

        RNase量(1.5mL离心管中)
稀释度           0.5 ug    5 ug    50 ug    100 ug
原液      
             +          +           +           +
10倍稀释            +  
       +           +           +
100倍稀释          +   
      +           +            -
1000倍稀释   
    +          -            -           -
表注:所有灭活条件均为室温静置放置5分钟,“+”表示百分百灭活,“-”表示部分灭活或不能灭活。RNase为液体溶液加入到1.5 mL塑料离心管中晾干而得,稀释液为新鲜稀释。

相关资料
远离EPC的三大理由
1.DEPC对人体有害。DEPC为高活性烷化试剂,能对蛋白质进行共价修饰,使其组胺基团的乙氧基甲酸化(RNase A活性位点有两个组氨酸,故能被灭活);同时它还能使RNA分子中没配对的腺嘌呤羧甲基化,改变其活性,严重时甚至会影响RNA形成杂交双链的能力。由于上述反应没有选择性,故对人体十分有害,归为强致癌物,使用时必须十分小心。
2.不能用DEPC处理下列溶液:一是含一级胺的试剂,如MOPS,TRIS, HEPES,PBS等,因其所含一级胺是DEPC攻击的目标,它们之间会发生化学反应;二是不能高压灭菌的溶液(如DTT,dNTP,MgCl2等),因为DEPC必须通过高压灭菌去除;三是不能用于某些高浓度的溶液(如0.1 M NH4Ac或NaAc),在这些溶液中DEPC的半衰期只有几分钟;四是不能用于pH值在4及以下的溶液,在此条件下DEPC对RNase没有灭活作用;五是DEPC不能与Polycarbonate和Polystyrene等塑料材料接触。
3.DEPC溶液不适合用于某些实验;一不能用于测OD,因为OD读数跟pH有关,DEPC在溶液中分解后变成乙醇和CO2,部分CO2与水反应形成碳酸,导致pH降低,进而降低OD值。二不能用于体外转录,有报道0.1% DEPC-treated water能使转录效率降低40%,这可能与DEPC降解产物有关。

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