CAT#:JW-230740
常温运输和保存

烟草DNA纯化试剂盒（过柱法A型）

产品及特点
烟草的分子鉴定是辨别其真伪，保证烟草质量，促进烟草产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒，高温烘烤等各种处理极大地破坏了烟草DNA的完整性，同时植物富含的多酚多糖及其氧化物在上述处理过程中也会与DNA发生复杂的化学反应，所以从烟草中提取DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题，本公司上开发了烟草专用核酸纯化试剂盒。其特点如下：
1.DNA更加纯净，大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
2.可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
3.操作更加简单，离心吸附操作代替离心沉淀，整个过程室温操作约10分钟，
适合大规模样品处理。
4.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
5.本产品足够50次烟草样本的微量纯化。
6.本试剂只能用于科研。

规格及成分
本产品采用大扁盒包装
成份                                                编号           规格            包装
烟草DNA纯化溶液A1                   230740a1    40 mL    60mL本色瓶
烟草DNA纯化溶液B1                   230740b1    20 mL    30mL本色瓶
烟草DNA纯化溶液C1                   230740c1    50 mL    60mL本色瓶
离心吸附柱                                    220144      50 套     塑料袋
通用洗柱液                                   220143       50 mL    60mL本色瓶
DNA洗脱液（基因组DNA专用）    220125    10 mL    10mL本色瓶
使用手册                                        22021sc    1份            无

运输及保存
常温运输和保存、有效期一年。

自备试剂
氯仿（也可省略，但产量会降低）

使用方法
注意：烟草DNA纯化溶液A1容易产生沉淀，烟草DNA纯化溶液B1十分粘稠，用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低，用前充分摇匀。
1.根据使用材料的不同进行下列操作：
a)对新鲜或冷冻的组织：先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg组织加0.8mL预热的烟草DNA纯化溶液A1，用剪切式匀浆器匀浆30秒左右，然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
b)对非冻型DNA保存液保存的组织：先用纸吸去保存液后再剪切成小块，其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2.加入0.4mL预热的烟草DNA纯化溶液B1到裂解液中。由于烟草DNA纯化溶液B1十分粘稠，可将1mL枪头剪掉一截再用，也可以用称量方法加0.4g。加入烟草DNA纯化溶液B1后需要颠倒数次充分混匀。
3.65℃水浴5-10分钟。如果室温放置，DNA产量将降低10-20%。
4.加入0.2mL自备氯仿，振荡器上充分振荡混均30秒，此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5.12000-15000g室温离心2分钟。上清透明，中间层为白膜（蛋白层）。
6.小心将上清液平均转移到两个新的离心管中，避免触及中间的白膜。
7.每个管中加入1.5倍体积的烟草DNA纯化溶液C1，充分颠倒混匀。
8.分两次上柱（即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液）。
9.加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10.加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
11.12000-15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
12.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
13.将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50-100 L DNA洗脱液（基因组DNA专用），室温放置离心吸附柱1-2分钟。
14.12000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

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