CAT#:JW-240108
常温运输及保存
RNA回收试剂盒(沉淀法)
产品及特点
本产品是专门用于从各种溶液中回收RNA的试剂盒。在RNA研究中,常常需要从各种酶反应体系中回收RNA。本产品就是为满足此需求而开发,它具有下列特点:
1.即开即用,操作简单。
2.在回收微量(浓度在10ng/mL以下)和痕量核酸(几十拷贝)时效率比柱式法或磁珠法高。
3.能有效去除溶液中的酶、DNA、盐离子、底物和其他物质。
4.可以用于从体外转录反应液、SPIA反应液、RNA加帽反应液、总RNA等溶液中回收RNA。
5.回收的微量或痕量RNA可以用于RT-PCR、RT-LAMP等后续扩增实验。
6.本产品能回收的RNA的最小片段长度为15nt。
7.如果每次处理100uL的反应液,本产品足够150次RNA微量回收。如果每次处理500uL的反应液,本产品足够30次RNA微量回收。
8.本产品只能用于科研。
规格及成分
本产品采用小扁盒包装
成份 编号 规格 包装
蛋白和DNA除去剂A 240108a 15 mL 15 mL棕玻瓶
蛋白和DNA除去剂B 240108b 3 mL 5 mL棕玻瓶
微量RNA沉淀剂 240108c 30 mL 30 mL本色瓶
RNA沉淀洗涤液 240108d 60 mL 60 mL本色瓶
RNase-free水 980403 1.5 mL 1.5mL本色管
使用手册 240108sc 1份 -
运输及保存
室温运输及保存,有效期一年。
自备物品
RNA样品
使用方法
一、如果不需要去除反应体系中的蛋白和DNA
1.将不超过500uL的装入1.5mL塑料离心管中。如果样本体积超过500uL,则需要将其分成多管进行回收,每管体积不超过500uL。
2.加入2倍体积的微量RNA沉淀剂并涡旋震荡15秒混匀。微量RNA沉淀剂含有絮状助沉剂,取用前需要充分摇匀再取用。
3.室温14000 g离心10分钟。如果RNA总量在2ng以下,建议将离心时间延长到20分钟。
4.小心吸弃上清。RNA将在离心管离心面的底部形成可见的微小沉淀,不要误吸。
5.加入0.4 mL RNA沉淀洗涤液,颠倒10次混匀。
6.14000 离心3分钟。注意确保离心管有细小沉淀的一面朝外(离心方向)。
7.小心吸弃上清。不要误吸微小的RNA沉淀。
8.再短暂离心,小心吸弃残留的液体(约50uL)。
9.加适量RNase-free水溶解沉淀得回收的RNA溶液。此RNA溶液可以直接使用,短时间不用需要放-80℃保存。
二、如果需要去除反应体系中的蛋白和DNA
10.将体积在100-500uL的样本装入1.5mL塑料离心管中。如果样本体积不足100uL,则加RNase-free水补足到100uL.如果样本体积超过500uL,则需要将其分成多管进行回收,每管体积不超过500uL。
11.加入等体积的蛋白和DNA除去剂A,涡旋震荡15秒。
12.室温放置2分钟。
13.加入0.2倍体积的蛋白和DNA除去剂B(如果第11步加了0.5mL蛋白和DNA除去剂A,则此步加0.2mL蛋白和DNA除去剂B),涡旋震荡15秒。
14.室温14000 g离心5分钟。
15.小心将无色的上清转移到新的离心管中,不要误吸有颜色的下层。
16.加入2倍体积的微量RNA沉淀剂并涡旋震荡15秒混匀。微量RNA沉淀剂含有絮状助沉剂,取用前需要充分摇匀再取用。
17.室温14000 g离心10分钟。如果RNA总量在2ng以下,建议将离心时间延长到20分钟。
18.RNA将在离心管离心面的底部形成可见的微小RNA沉淀,不要吸弃。
19.加入0.4 mL RNA沉淀洗涤液,振荡混匀。
20.14000 离心3分钟。注意确保离心管有细小沉淀的一面朝外(离心方向)。
21.小心吸弃上清。不要误吸微小的RNA沉淀。
22.再短暂离心,小心吸弃残留的液体(约50uL)。
23.沉淀即为回收的RNA沉淀,可加适量RNase-free水溶解后直接使用。短时间不用需要放-80℃。
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