CAT#:JW-221202-50
常温运输和保存，有低温成分

法医指甲DNA提取试剂盒（过柱法）

产品及特点
指甲的主要成分是角化蛋白，可以抵抗自然界中大多数的酶和化学物质，不易分解，正是因为指甲物证的不易破坏性、形态稳定性，指甲物证对于案件侦破具有关键作用。目前市场上专门用于法医指甲样品DNA提取的产品很少，为此本公司开发了本产品，它具有如下特点：
1.充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合，前者使DNA充分释放，后者使杂质充分被去除。
2.DNA回收率一般在0.5 μg/100 mg左右（理论产率一般是0.1-1.5 μg之间）。
3.DNA纯度高，OD比值一般在1.6-1.8之间。
4.提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
5.本产品足够50次微量提取。
6.本产品只可用于科研。

规格及成分
本产品使用大扁盒包装
成分                                                     编号            规格          包装
法医指甲DNA提取溶液A                221202-50a    50 mL    60 mL本色瓶
法医指甲DNA提取溶液B                221202-50b    15 mL    15 mL棕玻瓶
法医指甲DNA提取溶液C                221202-50c    50 mL    60 mL本色瓶
蛋白酶K溶液（10 mg/mL）           220137           1 mL      2.0 mL红盖管
通用洗柱液                                     220143           50 mL    60 mL本色瓶
DNA洗脱液（基因组DNA专用）    220125          10 mL    10 mL本色瓶
离心吸附柱                                        220144        50套      塑料袋
使用手册                                    221202-50sc       1份          1份

运输及保存
常温运输及保存（其中蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存。溶液B需要常温运输，4℃保存），有效期一年。

自备物品
1.5 mL塑料离心管、β-巯基乙醇、氯仿。

使用方法
1.将30-50 mg左右指甲剪碎，放入提前预冷至-70℃~-60℃的冷冻研磨仪中研磨成粉末，随后将样本转移到一个干净的1.5 mL塑料离心管中。
2.加入1 mL法医指甲DNA提取溶液A（使用之前需取本次实验所需的溶液A现加入自备的β-巯基乙醇，β-巯基乙醇的终浓度为5%）和20 μL蛋白酶K溶液（10 mg/mL），37℃保温10小时（一般过夜保温就可以）。注意：最好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让指甲溶化。
3.加入0.3 mL的法医指甲DNA提取溶液B和0.2 mL的自备氯仿，振荡器上振荡30秒充分混匀。
4.12,000 rpm室温离心3分钟，小心将上清转移到新的1.5 mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的法医指甲DNA提取溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8 mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12,000 rpm室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
7.将0.7 mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
8.将0.3 mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm离心半分钟（此步为第二次洗涤，一般可以省略）。
9.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在一新的1.5 mL塑料离心管中，加入30 μL DNA洗脱液（基因组DNA专用）。
11.12,000 rpm离心1分钟，管底即为指甲DNA溶液，可立即用于PCR，也可长期保存在-20℃。注意：由于指甲中DNA的含量十分少，所以电泳检测时即使全部上样也只能看见十分微弱的DNA条带。

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