CAT#:JW-231107
低温运输，-20℃保存

2×直扩PCR预混液

产品及特点
本产品是一种使用便捷的专门用于液体样品的2倍浓度的PCR预混液，可用于从各种液体样本中直接扩增DNA靶标，而无需纯化DNA。本产品含DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、电泳示踪染料等所有PCR所需要的成分。它具有如下特点：
1.操作简单，无需纯化，液体样本可直接作为扩增模板。
2.方便快捷，用户只需加入自备引物模板即可进行PCR扩增。
3.扩增效率高，最长可扩增长达5kb的DNA片段，方便对不同长度的基因组片段进行共循环。
4.本产品扩增后可直接上样电泳，无需加上样缓冲液，进一步简化了操作。
5.直扩液体样本的体积可以达到PCR反应终体积的20%。
6.可用于多种液体样本的直接扩增，包括血液、唾液、菌液等。
7.本产品足够500次20μL体系的PCR扩增。
8.本产品只可用于科研。

规格及成分
成份                               编号            规格        包装
2×直扩PCR预混液       231107    1 mL×5    1.5 mL本色管
使用手册                    231107sc    1份            无
本产品使用塑料袋包装

运输及保存
低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备物品
液体样本，引物，超纯水，荧光PCR模板专用稀释液。

使用方法
1.标记N+2个PCR管，其中N个为直扩液体样本，额外增加的两个管一个用于PCR阳性对照，另一个用于PCR阴性对照。按照下表在各PCR管中加入下列成分：
成份                                    N+2个样品管    PCR阴性对照     PCR阳性对照
2×直扩PCR预混液                各10 μL           10 μL                     10 μL
自备引物混合液（10μM）    各2 μL               2 μL                     2 μL
直扩液体样本                        各8 μL              不加                      不加
超纯水                                    不加                8 μL                       不加
自备PCR阳性对照                 不加                 不加                        8 μL
2.放入PCR仪中进行PCR。
3.PCR反应结束之后，建议3000-5000g离心3-5min以沉淀样本中细胞碎片，便于吸取上清用于电泳分析等。
4.离心后取5-10μL直接上样电泳（本产品可以直接上样，不需要加上样液），红色示踪染料电泳速度相当于50bp DNA片段。

注意：
1.如果反应体系不是20 L，各成分需要等按比例增加或减少。
2.如果液体样本中有PCR不明抑制物，可以将样本加入荧光PCR模板专用稀释液（CAT#:JW-180701，样本与荧光PCR模板专用稀释液按照1：9的比例进行稀释）稀释后再进行PCR扩增。
3.新合成的引物使用前，应先对其真实浓度进行校准。扩增效率低的情况下，可适当提高引物浓度；发生非特异性扩增时，可适当降低引物浓度。

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dNTP混合液各10mM