CAT#:JW-221184
低温运输,2-8℃保存
PicoGreen超敏dsDNA定量试剂盒
产品及特点
对dsDNA进行准确定量是很多重要的分子生物学实验的前提。不同的定量方法有不同的线性范围和检测灵敏度,对干扰的屏蔽能力也各不相同。其中, OD260测定法操作最简单,但灵敏度只有5 μg/mL,不能屏蔽单链DNA、RNA和核苷酸的干扰。为此本公司开发了基于H33258荧光染料的dsDNA定量产品,它具有下列特点:
1.即开即用,用户不需要单独摸索最佳条件。
2.操作简单,只需要将H33258工作液与待测样品混合即可。
3.彻底屏蔽RNA的干扰,同样浓度RNA产生的荧光不超过DNA的1%,尤其适用于直接用细胞裂解液测定DNA浓度(此时有大量RNA存在)。但需要先将细胞裂解液稀释到NaCl浓度不超过3M,SDS浓度不超过0.01%。
4.提供阳性对照DNA,用于制备标准曲线。阳性对照DNA AT含量为59%。
5.需要激发波长为365nm,发射波长为458nm的荧光仪。可选用比色皿检测模式或多孔板检测模式。
6.灵敏度比OD260测定法高500倍,为10 ng/mL。
7.线性范围为10ng/mL-10mg/mL。
8.Hoechst 33258荧光染料与单链DNA结合时发出的荧光并不会与单链NA浓度成比例,故能部分屏蔽单链DNA的干扰。
9.所用H33258染料对dsDNA具有高度选择性,主要识别AT区。
10.线性范围在10ng/mL-10ug/mL(相当于10pg/uL-10ng/uL)。
11.本产品足够100次100uL体系的测定,每次用10uL样品。
12.本产品只能用于科研。
规格及成分
本产品采用小扁盒包装
成分 编号 规格 包装
Hoechst33258-DNA结合液 221184a 1 mL 1.5mL白盖管
dsDNA定量阳性对照,10mg/mL 221184b 1 mL 1.5mL黄盖管
Hoechst33258染液,10mg/mL 221184c 30 mL 30mL棕塑瓶
使用手册 221184sc 1份 无
运输及保存
低温运输,2-8℃保存,有效期半年。
自备试剂
能检测激发波长为365nm,发射波长为458nm的荧光仪
使用方法
1.将Hoechst33258用Hoechst33258-DNA结合液稀释成1mg/mL,此为工作液,放冰上待用。
2.打开仪器预热10-15分钟。
3.将DNA阳性对照用Hoechst33258-DNA结合液稀释成100ug/mL、10ug/mL、1ug/mL、 100ng/mL、10ng/mL、0mg/mL共六个浓度。
4.将Hoechst33258染料工作液和上述六个溶液混合,测定458nm光吸收(激发波长为365nm)。
5.将Hoechst33258染料工作液和样本1:1混合,测定458nm光吸收(激发波长为365nm)。
6.制作标准曲线应从中确定样本中的DNA浓度。
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