CAT#:JW-221226-400
常温运输，2-8℃保存

免DNA提取PCR试剂盒

产品及特点
本产品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品的裂解液进行PCR扩增的试剂盒。免DNA提取PCR，即在传统PCR技术的基础上，免去DNA提取步骤。它有下列特点：
1.操作简单，免去DNA提取、蛋白去除、RNA去除等步骤，5分钟即得用于PCR的模板。
2.兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
3.提供离心管专用研磨杵，便于处理棘手样品。
4.环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。
5.尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。
6.本试剂盒可以处理400份不同的样品，足够400次PCR实验。
7.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品采用大扁盒包装
成份                                       编号            规格       包装
免DNA提取PCR溶液A        221226a    48 mL       60 mL本色瓶
免DNA提取PCR溶液B        221226b    48 mL       60 mL本色瓶
PCR MasterMix                    990805    1 mL×6    1.5 mL绿盖管
离心管专用研磨杵                221226c    200只×2    塑料袋
使用手册                              221226sc    1份            无

运输及保存
免DNA提取PCR溶液A、免DNA提取PCR溶液B和离心管专用研磨杵可以常温和放置，PCR MasterMix需要低温运输，-20℃保存。有效期一年。

自备试剂
无

使用方法
1.首次使用本制品时需要详细检查免DNA提取PCR溶液A和免DNA提取PCR溶液B是否有结晶析出。如果有需要37℃溶解后摇晃均匀待用。未用完部分可以放常温保存。
2.根据材料不同参考下表取少量样品到1.5 mL塑料离心管中。
样品种类                    取样量
动物组织                    1～5 mg
鼠尾                            2 mm长
血液样品                   不超过20 μL
植物叶片                    1～5 mg
植物种子（去皮）     1～5 mg
酵母培养物                 0.2～0.5 mL培养物沉淀
细菌培养物                0.2～0.5 mL培养物沉淀
3.注意：未列出的样品，用户需要自己摸索最佳用量。对富含多醌多酚的植物材料（如棉花），组织使用量最好不要超过0.5 mg。
4.加入100 μL免DNA提取PCR溶液A，确保免DNA提取PCR溶液A完全将样品淹埋。
5.用离心管专用研磨杵小心将样品在离心管内捣碎。血液一般情况捣碎30秒即可；实体组织需要捣碎到溶液的颜色变浑浊（植物叶片的话，溶液的颜色将变成绿色）。如需更多研磨杵，可从我司另购。对棘手的样品，还可以增加95℃保温10～60分钟一步，待温度冷却到室温后再进入下一步。残留的实体组织碎片不会影响后续试验。
6.加入100 μL免DNA提取PCR溶液B，震荡10秒混匀。
7.常温12000 rpm离心2分钟。
8.将上清液转移到一个干净的1.5 mL离心管中。如果不用，可以放-80℃长期保存。如果用于后续PCR，请直接进入下步。
9.直接用裂解液作为模板设置30 μL体系的PCR反应体系如下：
成份                                        用量
PCR MasterMix                   15 μL
细胞裂解液（来于上步）     1-5 μL
自备PCR引物1（10 μM）    1 μL
自备PCR引物2（10 μM）    1 μL
补自备超纯水到                    30 μL
注意：裂解液体积最好不要超过PCR体积的1/10。如果需要增加模板的加入量，则PCR体系应该相应的增加。如果加入5 μL裂解液，则可以使用50 μL的PCR体系。
10.放入PCR仪中进行PCR，PCR参数需要根据引物Tm值和靶分子长度等参数设置。一般不低于35次循环。
11.PCR结束后取5～10 μL直接上样电泳（本产品不需要上样液），红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。

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