CAT#:JW-230208-50
常温运输和保存，有一个低温成分

动植物总蛋白微量纯化试剂盒

产品及特点
本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western
印迹分析以及蛋白活性测定等。本产品的其主要特点是：
1.提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2.采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。

规格及成分
本产品使用小扁盒包装，有一个低温成分
名称                                            编号        规格           包装
动植物总蛋白微量提取溶液A    230208a    250mL    250mL本色瓶
5×SDS-PAGE上样液                230208b    250mL    250mL本色瓶
使用手册                                  230208sc    1份           无

运输及保存
常温运输和保存，但收到货后5×SDS-PAGE上样液需-20℃保存，频繁使用时可以放4℃保存，产品有效期为出厂后一年。

自备试剂
无

使用方法
注意：使用前，最好请在动植物总蛋白微量提取溶液A中加入自备的、新鲜配制的1M DTT溶液50uL。
一：匀浆法
注意：对致密的实体组织（如肌肉），最好用Polytron剪切式匀浆机匀浆处理。
1.称取动物或植物组织样品100 mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15 mL的塑料离心管中。
2.加入1mL动植物总蛋白微量提取溶液A，在冰上用Polytron剪切式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3.将匀浆液全部转移到1.5 mL的塑料离心管中。
4.4℃ 12,000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×（加入样品体积的1/4即可，40uL样品加入10uL 5×SDS-PAGE上样缓冲液），在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。

二：直接研磨法
注意：可以使用玻璃和陶瓷的研钵，也可以使用与微量离心管式的研磨杵
1.称取动物或植物组织样品100 mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到预冷的研钵或离心管中。
2.加入1mL动植物总蛋白微量提取溶液A，用研磨杵研磨，直到没有肉眼可见的组织块。
3.将匀浆液全部转移到1.5 mL的塑料离心管中。
4.4℃ 12,000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5 mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×（加入样品体积的1/4即可，40uL样品加入10uL 5×SDS-PAGE上样缓冲液），在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。

三：液氮研磨法
注意：最好使用玻璃和陶瓷的研钵
1.取大约100 mg动物或植物组织样品，转移到预冷的研钵中。
2.加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。
3.加入1mL动植物总蛋白微量提取溶液A溶解，然后将溶液全部转移到1.5 mL
4.的塑料离心管中。
5.4℃ 12,000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
6.将上清液转移至一新的1.5 mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×（加入样品体积的1/4即可，40uL样品加入10uL 5×SDS-PAGE上样缓冲液），在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。

注意：
1.如果4℃ 12,000 g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀，可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12,000 g离心10分钟，以去除可见的小碎片。
2.植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物，如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质，可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙酮或冷甲醇，混匀后-20℃放置1小时或过夜，然后4℃ 12,000 rpm离心10 min，弃上清后室温风干3-5分钟，然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后，部分蛋白质可能会发生变性，不能再用于活性检测。

关联产品
真菌总蛋白质微量纯化试剂盒