CAT#:JW-230136
常温运输和保存,有低温成分
毛发DNA纯化试剂盒(过柱法)
产品及特点
毛发的主要成分是角化蛋白,可以抵抗自然界中大多数的酶和化学物质,不易分解,正是因为毛发物证的不易破坏性、形态稳定性,毛发物证对于案件侦破具有关键作用。目前市场上专门用于毛发样品DNA纯化的产品很少,为此本公司开发了本产品,它具有如下特点:
1.充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合,前者使DNA充分释放,后者使杂质充分被去除。
2.DNA回收率一般在0.5 μg/100 mg左右(理论产率一般是0.1-1.5 μg之间)。
3.DNA纯度高,OD比值一般在1.6-1.8之间。
4.适合于头发及动物的各种毛发材料,包括鸟类的羽毛。
5.提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
6.本产品足够50次微量提取,每次可以处理50mg的毛发。
7.本产品只可用于科研。
规格及成分
本产品使用大扁盒包装,但蛋白酶K溶液塑料袋包装,低温运输
成分 编号 规格 包装
毛发DNA提取溶液A 230136a 50 mL 60 mL本色瓶
毛发DNA提取溶液B 230136b 25 mL 30 mL棕玻瓶
毛发DNA提取溶液C 230136c 50 mL 60 mL本色瓶
毛发DNA纯化还原剂 230136d 5 mL 5 mL本色瓶
蛋白酶K溶液(10 mg/mL) 220137 1 mL 1.5 mL白盖管
通用洗柱液 220143 50 mL 60 mL本色瓶
DNA洗脱液(基因组纯化专用) 220125 10 mL 10 mL本色瓶
离心吸附柱 220144 50套 塑料袋
使用手册 230136sc 1份 1份
运输及保存
常温运输及保存(其中蛋白酶K溶液需要低温运输,-20℃保存。溶液B需要常温运输,4℃保存),有效期一年。
自备物品
1.5 mL塑料离心管、2 mL塑料离心管。
使用方法
1.将30-50 mg左右头发充分剪碎成芝麻大小,将剪碎后样本转移到一个干净的1.5 mL塑料离心管中。注意:最好从靠近根部的地方剪取样品。
2.加入1 mL毛发DNA提取溶液A、50 μL还原剂和20 μL蛋白酶K溶液(10 mg/mL),37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。注意:最好让反应体系处于摇晃状态,此保温长度一般可以让毛发溶化。
3.加入0.5 mL的毛发DNA提取溶液B,振荡器上振荡30秒充分混匀。
4.12,000 rpm室温离心5分钟,小心将上清转移到新的2 mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的毛发DNA提取溶液C,上下颠倒30秒充分混匀。
6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8 mL混合液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12,000 rpm室温1分钟,弃穿透液。再把剩余的一半上柱,重复此操作。
7.将0.7 mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000 rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8.将0.3 mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000 rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
9.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在一新的1.5 mL塑料离心管中,加入30 μLDNA洗脱液(基因组DNA专用)。
11.12,000 rpm离心1分钟,管底即为头发DNA溶液,可立即用于PCR,也可长期保存在-20℃。注意:由于头发中DNA的含量十分少,所以电泳检测时即使全部上样也只能看见十分微弱的DNA条带。
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