CAT#:JW-230334
低温运输，-20℃保存

LAMP荧光染料,20×

产品及特点
荧光染料包括非饱和荧光染料和饱和荧光染料，常用的SYBR Green I核酸染料属于非饱和型荧光染料，它在高浓度下会抑制荧光LAMP和其他核酸扩增反应，在较低浓度时，染料分子跟DNA的合成线性关系不强（见下右图），反应重复性不稳定。而饱和荧光染料，在饱和浓度下不会抑制核酸扩增反应，染料分子跟DNA的合成线性关系很强（见下左图），反应重复性很好。
    
本产品是天净沙的一款优选LAMP饱和型荧光染料，它具有下列特点：
1.LAMP荧光染料，可在饱和浓度使用，不光试验重复性更好，而且信噪比更高。
2.抗水解、抗热解和抗光解的能力强于SYBR Green I。
3.跟目前常用的核酸扩增仪器兼容，不需要改变任何设置，直接在SYBR Green I通道采集信号即可。
4.不能渗透进入细胞内，毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
5.可以用于LAMP、RT-LAMP和qLAMP等核酸扩增反应。
6.本产品足够1000次20μL体系的核酸扩增反应。
7.本产品只能用于科研。
规格及成分
本产品采用塑料袋包装
成份                                编号    规格    包装
LAMP荧光染料,20×    230334    1mL    1.5mL棕色管
使用手册                  230334sc    1份    无

运输及保存
常温运输、-20℃避光保存，有效期一年。

自备试剂
LAMP或RT-LAMP试剂盒

使用方法
1.先将本产品放置在室温融化，然后震荡10秒钟，短暂离心后备用。
2.按下表设置20μL的LAMP反应体系：
成份                                    样品管    阴性对照
4×LAMP Mix                           5μL    5μL
自备FIP引物终浓度            0.8μM    0.8μM
自备BIP引物终浓度            0.8μM    0.8μM
自备F3引物终浓度            0.2μM    0.2μM
自备B3引物终浓度            0.2μM    0.2μM
自备Loop F引物终浓度（可选项）    0.4μM    0.4μM
自备Loop B引物终浓度（可选项）    0.4μM    0.4μM
自备模板DNA                   1-100ng    不加
Bst DNA聚合酶(8U/μL)        1.5μL    1.5μL
本产品                                     1μL    1μL
补水到                                    20μL    20μL
3.65℃保温1小时。
4.荧光分析（仅限于用qPCR仪进行反应的场景）：样品制备阳性对照和LAMP阳性对照的反应液将有标准的S扩增曲线，样品制备阴性对照和LAMP阴性对照的反应液将没呈平线，没有S曲线，否则提取实验或扩增实验无效。如果阳性和阴性对照结果正常，则实验有效，可以分析样品的情况。样品管的荧光曲线为S型，则说明样品为阳性，如果为平线则说明待测样品为阴性。典型的荧光检测结果见下图。左边为阳性，右边为阴性。

5.电泳分析：由于取样时非常容易产生气溶胶污染，污染实验环境并且非常难清除污染，所以强烈建议不要采取此方法分析实验结果。即使使用，也要在不同的房间，使用不同的移液枪操作。具体做法是取10μL LAMP扩增产物跟自备上样液混合后进行2%琼脂糖凝胶电泳。LAMP阳性对照必须有正常LAMP条带（200bp左右的梯形扩增产物），LAMP阴性结果必须无条带，否则实验结果无效。如果LAMP阳性对照和阴性对照结果正常，再分析待测样品。典型的电泳结果见下表，奇数样为阴性结果，偶数样为阳性结果：

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