CAT#:JW-230337
低温运输，-20℃保存

LAMP专用羟基萘酚蓝溶液，12mM

产品及特点
羟基萘酚蓝（Hydroxy Naphthol Blue，HNB）的CAS号为165660-27-5，其分子结构式如下：
羟基萘酚蓝(HNB)是一种金属离子指示剂,LAMP-HNB的变色原理为:HNB与镁离子结合使得反应体系初始颜色为紫罗兰色,随着反应的进行,镁离子与析出的焦磷酸根离子反应生成焦磷酸镁沉淀,羟基萘酚蓝失去了镁离子使得体系颜色变为天蓝色,而未反应的体系则仍保持着紫罗兰色。另外,HNB可以在LAMP反应前加入,有效的减少了反应污染的可能性。本产品就是专门用于LAMP扩增的羟基萘酚蓝溶液，其浓度为12 mM，它具有下列特点：
1.即开即用，可以直接加入到含Mg的LAMP扩增体系中使用。
2.本产品的最佳用量根据LAMP体系不同需要用户自己优先选择，但一般终浓度为25 mM左右， 需要终浓度为0.5 mM的Mg离子存在，并且Mg离子浓度跟标准LAMP反应的Mg离子浓度一样。
3.本产品只能用于科研。

规格及成分
成份                                                        编号        规格        包装
LAMP专用羟基萘酚蓝溶液，12mM    230337      1 mL    1.5 mL棕色管
使用手册                                            230337sc    1份        无
本产品采用塑料袋包装

使用方法
1.将本产品放置在室温融化30分钟，震荡10秒钟，短暂离心后放冰上待用。
2.按下表设置20 mL体系的LAMP反应：
成份                                    样品管        阴性对照
4×LAMP Mix                           5 mL        5 mL
自备FIP引物终浓度            0.8 mM        0.8 mM
自备BIP引物终浓度            0.8 mM        0.8 mM
自备F3引物终浓度            0.2 mM        0.2 mM
自备B3引物终浓度            0.2 mM        0.2 mM
自备Loop F引物终浓度（可选项）    0.4 mM        0.4 mM
自备Loop B引物终浓度（可选项）    0.4 mM        0.4 mM
自备模板DNA                       1-100ng        不加
Bst DNA聚合酶(8U/mL)        1.5 mL        1.5 mL
自备MgCl2溶液，5 mM        2 mL            2 mL
加本产品到终浓度            25 mM左右       25 mM左右
补水到                                        20 mL        20 mL
3.65℃保温1小时。
4.LAMP扩增后用肉眼观察，有核酸扩增的将变色，管中液体颜色由紫罗兰色变为天蓝色。没有扩增的将不变色，管中液体颜色仍为紫罗兰色。典型的实验结果如下图（左边为阴性结果，右边为阳性结果）：

5.也可以电泳检测实验结果（强烈不推荐此法，因为电泳时产生的气溶胶非常容易污染环境，使得今后用同一引物扩增时产生假阳性）：取5-10 mL扩增产物和自备的上样液混合，上样，进行2-3%的琼脂糖凝胶电泳，有LAMP扩增的样品将可见LAMP特征性电泳图谱。

运输及保存
低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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