CAT#:JW-221040-50
常温运输和保存

小RNA胶回收试剂盒（沉淀法）

产品及特点
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离100 nt以下的小片段RNA，尤其是20 nt左右的microRNA (miRNA)的主要方法，但是目前市场上用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收miRNA片段的产品还很少，为此本公司开发了本产品。它具有下列特点：
1.可以回收15-3000 nt范围内的各种长度的RNA，包括100 nt以下miRNA片段。
2.miRNA回收率达到90%左右，3000 nt的RNA的回收率达到30%左右。
3.一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
4.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
5.储存方便，试剂盒可以在室温放置数月，不影响其质量。
6.也可用于从琼脂糖凝胶中回收miRNA。
7.本产品足够50次小RNA的微量回收。
8.本产品只能用于科研。

规格及成分
成份                                编号        规格        包装
小RNA胶回收溶液A    221040a    25 mL    30 mL本色瓶
小RNA胶回收溶液B    221040b    50 mL    60 mL本色瓶
小RNA胶回收溶液C    221040c    50 mL    60 mL本色瓶
使用手册                     221040sc    1份       无
本产品使用小扁盒包装

运输及保存
常温运输和保存，保存期为一年。

自备试剂
固相RNase清除剂，PAGE凝胶电泳试剂，EB或其他RNA染料，刀片，
RNase-free的1.5 mL塑料离心管，移液枪，RNase-free水

使用方法
1.用自备的固相RNase清除剂或类似的产品对实验所需要的物品进行去RNase处理（固相RNase清除剂可以从本公司另购）。
2.对RNA样品进行PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3.电泳结束后用EB或其他RNA染料对PAGE胶进行染色并确定目标RNA条带所在的位置。
4.用干净的刀片切下目的RNA条带，置于RNase-free的1.5 mL塑料离心管中。
5.用移液枪头捣烂凝胶块，使其断裂成芝麻大小或更细，也可以包在锡箔纸活塑料膜中放-80℃冻成硬块，然后在包着的状态下，用研磨杵研磨成粉，越细越好。
6.在捣碎的PAGE胶中加入0.5 mL小RNA胶回收溶液A。
7.在摇床上室温摇晃4小时（小于500nt的RNA片段）或24小时（对1000nt以上的RNA片段）。
8.13000g室温离心10分钟，转移上清到一只新的RNase-free 1.5 mL塑料离心管中。
9.加入2倍体积（1 mL）的小RNA胶回收溶液B。注意：小RNA胶回收溶液B有沉淀，属于正常现象，用前必须摇晃均匀取用。
10.上下颠倒数次混匀后，13000g室温离心30分钟。
11.小心用移液枪弃上清，RNA（和小RNA胶回收溶液B中的助沉剂）在管底离心面会形成细小白色沉淀，注意不要吸弃此沉淀。
12.管中再加入1 mL小RNA胶回收溶液C。
13.颠倒数次混匀后13000g室温离心5分钟。
14.小心弃上清，注意不要吸弃管底的细小沉淀。
15.再短暂离心半分钟，吸尽残留的约50 mL的液体。
16.将RNA沉淀溶于适量的（如30-50 mL）自备的RNase-free水中或直接溶解在后续反应的反应液中，立即使用或放-70℃保存。

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