CAT#:JW-221018
常温运输和保存

植物油DNA纯化试剂盒（沉淀法）

产品及特点
本产品是专门用于从植物油中提取痕量DNA的试剂盒。由于精制食用植物油生产过程中有高温高压过程，因此DNA破坏严重。同时DNA在植物油中的溶解度非常小，因此残留DNA浓度非常低，一般在0.1-0.5 pg/mL范围，要提取到这些痕量的DNA非常困难。为了解决这一难题，专门开发出了本产品，它具有下列特点：
1.本试剂盒足够5次植物油DNA提取，每次50 mL植物油，如果按0.1-0.5 pg/mL的浓度，可提出约5-25 pg的植物油DNA。
2.本产品纯化得到的植物油DNA为痕量，不能电泳检测，不能测OD（低于检测极限），只能用PCR检测。
3.沉淀法，DNA回收率高达90%。
4.适用于各种植物油，如大豆油、菜籽油、葵花籽油及各种调和油，所得DNA可以用于×g基因检测。
5.操作简单，提取过程一般只需要30分钟。
6.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品采用大扁盒包装
成份                                    编号             规格                     包装
植物油DNA纯化溶液A    221018a        250 mL                250 mL本色瓶
植物油DNA纯化溶液B    221018b        500 mL                1.5 mL白盖管
植物油DNA纯化溶液C    221018c        250 mL                250 mL本色瓶
Tris饱和PCI混合液（pH 7.5，25:24:1，DNA提取专用）    220164        250 mL    250 mL棕玻瓶
微量核酸沉淀剂                220313        250 mL×2               250 mL本色瓶
DNA洗脱液（基因组纯化专用）    220125        10 mL         10 mL本色瓶
使用手册                    221018sc               1份                1份

运输及保存
常温运输和保存，溶液B需放-20℃长期保存，有效期一年。

自备试剂
异丙醇，75%乙醇。

使用方法
1.在一个250 mL的塑料烧杯或塑料三角瓶中（注意：只能用塑料烧杯，不能用玻璃烧杯，因为玻璃会吸附DNA），加入50 mL植物油样品、50 mL植物油DNA纯化溶液A和100 mL植物油DNA纯化溶液B，磁力搅拌2-4小时，
2.加入50 mL植物油DNA纯化溶液C，继续磁力搅拌3小时。此时溶液体积为150 mL。
3.将150 mL混合液平均分到4个50 mL离心管中（每管大约37 mL），8,000 rpm离心5分钟。管中液体将分为上层的油相和下层的水相（水相大约有12 mL）。
4.用移液枪直接取下层水相到新的离心管中，加入等体积的Tris饱和酚-氯仿-异戊醇（25:24:1），震荡混匀。
5.8,000 rpm离心5分钟，管中液体将分为上层的水相和下层的有机相。小心取水相到一新的离心管中。
6.各加入2倍体积的微量核酸沉淀剂（12 mL液体需要加24 mL微量核酸沉淀剂），颠倒混匀后，12,000 rpm离心30分钟。
7.弃上清液，保留沉淀（含植物油DNA）。
8.再离心1分钟，弃管中残留液体。
9.各用100 mL DNA洗脱液（基因组纯化专用）溶解沉淀，最后将400 mL（每管100 mL，共4管）DNA溶液汇集到1各个1.5 mL的离心管中。
10.加等体积（400 mL）的Tris饱和酚-氯仿-异戊醇（25:24:1），充分震荡3分钟。
11.8,000 rpm离心5分钟，管中液体将分为上层的水相和下层的有机相。小心取水相到一新的离心管中。
12.加入2倍体积（800 mL）微量核酸沉淀剂，颠倒10次混匀后，13000 rpm离心15分钟，小心弃上清。
13.加入自备的75%乙醇，13,000 rpm离心5分钟。
14.小心弃上清。
15.再离心1分钟，吸弃管中残留液体。
16.加入50 mL DNA洗脱液（基因组纯化专用），溶解DNA沉淀，待用。由于50 mL植物油按0.1-0.5 pg/mL的浓度计算，最多可提出约5-25 pg的DNA，故只能PCR检测回收效果，不能电泳和测OD。

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