CAT#:JW-221020-50
常温运输和保存

血清血浆游离DNA纯化试剂盒（过柱法）

产品及特点
本产品是基于离心柱层析法，用于从血浆/血清中方便、快速、可靠地提取游离循环DNA（circulating DNA、cell-free DNA，cfDNA）。它具有下列特点：
1.操作简单，整个过程只需要 20 分钟左右。
2.不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
3.安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
4.与PCR、荧光PCR和LAMP等核酸扩增兼容。
5.可在30 uL~100 uL范围内灵活调节洗脱体积浓缩循环 DNA。
6.适用于各种血清和血浆。
7.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品使用大扁盒包装
名称                                       编号        规格           包装
血清血浆游离 DNA溶液A    221020a    30 mL       30mL本色瓶
上柱结合液                        990602       40 mL       60mL本色瓶
离心吸附柱                        220144        50套       塑料袋
通用洗柱液                        220143       50 mL        60mL本色瓶
DNA 洗脱液（基因组纯化专用）    220125    10 mL    10mL本色瓶
使用手册                            221020sc        1份       无

运输及保存
常温运输及保存，柱式血清/血浆游离 DNA 溶液A长期（1月以上）放置时需要放4℃，有效期一年。

自备试剂
无，但需要自备RNase-free 的1.5 mL离心管（耗材）。

使用方法
1.如果有N个样品，标记N+2 个1.5-2 mL螺旋盖塑料离心管，多出的一个为阳性对照（PC），一个为阴性对照（NC）。为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记，以在后续操作时区别向心面和离心面。然后在离心管中分别加入0.2 mL血清或血浆，在PC管中加入已经确认有阳性DNA的血清或血浆，在NC管中加入已经确认没有阳性DNA的血清或血浆。
2.加入0.6 mL柱式血清/血浆游离DNA到各离心管中，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意：柱式血清/血浆游离DNA溶液A在4℃放置后可能会产生结晶，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3.加入0.8mL上柱结合液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液约0.8mL 到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
4.12,000 rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
5.将剩余的另外一半裂解液约0.8mL转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
6.12,000 rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
7.加入0.7 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp室温离心1分钟，弃收 集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
8.加入0.3 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp室温离心1分钟，弃收 集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤，可以跳过。
9.12,000 rpm室温离心1分钟（干甩），弃含穿透液的离心管。
10.将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的1.5 mL离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30uL DNA洗脱液3.0，然后室温放置2分钟。
11.12,000 rpm室温离心1分钟，离心管中的溶液即为游离DNA溶液。
12.DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

关联产品
血清血浆游离DNA纯化试剂盒（沉淀法）