CAT#:JW-220753-100
常温运输，4℃保存

加强型DAB显色试剂盒

产品及特点
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶（HRP）的所有试剂，适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物，可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量，进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下：

本产品具有下列特点：
1.即开即用，不需要用户准备任何材料。
2.DAB以干粉提供，方便运输。
3.可用于各种印迹膜（包括Southern、Northern、Western印迹膜）和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4.跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5.显色过程中需要避光，在显色后可拍照或扫描。
6.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品采用小扁盒包装
成份                        编号            规格            包装
DAB干粉                 220753a    100 mg    0.5 mL棕色管
10 mL塑料瓶           220753b    1个           1个
20×DAB溶解液       220753c    5 mL    5 mL本色瓶
增强剂                    220753d    1 mL    1.5 mL棕色管
双氧水原液             220753e    1 mL    1.5 mL白盖管
使用手册                220753sc    1份           1份
注意：本产品可以配制100 mL增强型DAB显色液，但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。

运输及保存
常温运输，4℃保存，有效期1年。

自备试剂
超纯水、HRP标记物（抗体或探针）处理过的印迹膜

使用方法
注意：DAB有毒性，处理时需要戴手套。
1.在10 mL塑料瓶（本试剂盒提供）中加入自备去离子水4.75 mL，加入20×DAB溶解液0.25 mL，摇匀，将100 mg DAB干粉全部加入，充分振荡混匀，所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完，可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2.按每cm2印迹膜需要0.1 mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量，并按下表配制DAB显色液（此处以配制10 mL为例，用户如需要配制其他体积，可按比例增减各成分用量）：
成份                       用量
20×DAB溶解液    0.5 mL
自备去离子水       9 mL
20×DAB浓缩液    0.5 mL
增强剂                  0.1 mL
双氧水原液          10 uL
注意：此溶液必须现配现用。
3.如果是印迹膜，则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中，室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时（一般需要2-3分钟，最长不超过10分钟，具体跟靶分子浓度密切相关），迅速将印迹膜转移到盛有去离子水的托盘中摇晃，终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分，照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4.如果是组织切片，则直接将DAB染色液滴加在切片上，室温避光放置10分钟，然后浸在超纯水中数次，空气中干燥后显微镜下检测或照相。

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