酸性磷酸酶活力法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒产品说明书

主要用途
酸性磷酸酶活力法细胞繁殖与毒性定量检测试剂是一种旨在通过细胞膜相关性酸性磷酸酶切离 其底物对硝基苯磷酸， 生成黄色可溶性产物对硝基酚，  作为检测信号来比色定量测定活体细胞繁殖和毒性 的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适用于各种生长中的真核 生物细胞。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，操作简捷，着色清晰，重复可靠。

技术背景
作为细胞染色剂之一的对硝基苯磷酸(p－Nitrophenylphosphate；PNPP)，是酸性磷酸酶的一种可溶性无色 底物， 其代谢产物对硝基酚呈现黄色。细胞繁殖快， 其代谢旺盛， 细胞膜上的酸性磷酸酶的活性增强，从 而切离对硝基苯磷酸， 而产生颜色深浅， 在 405nm 波长下产生吸收峰： 吸光值与细胞量成线性正相关， 反 映细胞活力。

产品内容
缓冲液(Reagent A)          毫升
染色液(Reagent B)          毫升
产品说明书                    1 份

保存方式
保存在－20℃冰箱里，避免光照，有效保证 6 月

用户自备
酶标仪：用于定量检测染色细胞
移液排枪：用于同步加入染色试剂

实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒放在室温下融化，置于暗室里。然后进行下列操作。

一、  直接检测
1 ．  从细胞培养箱里取出待测的 96 孔细胞培养板
2 ．  确保 96 孔板中每一个孔含有 200 微升细胞培养液(注意： 建议使用无酚红培养液)
3 ．  小心加入 xx 微升 染色液(Reagent B) 到 96 孔板中每一个孔里
4 ．  轻轻摇动 96 孔板，使其混匀
5 ．  放进 37℃培养箱里，孵育 2 小时(可见溶液呈现黄色)
6 ．  即刻放进酶标仪测读：染料波长 405nm；参考波长 690nm
7 ．  实际读数： OD405－OD690
8 ．  绘制细胞生长曲线：纵座标(Y 轴)为吸光值(OD)；横坐标(X 轴)为细胞数

二、  间接检测
1 ．  准备 1 个 50 毫升锥形离心管
2 ．  加入 xx 毫升 缓冲液(Reagent A)
3 ．  加入 xx 毫升 染色液(Reagent B)，混匀
4 ．  放在暗室里备用，避光，标记为 染色工作液
5 ．  从细胞培养箱里取出待测的 96 孔细胞培养板
6 ．  小心抽去细胞培养液
7 ．   (选择步骤)加入 xx 微升 缓冲液(Reagent A) 到 96 孔板中每一个孔里
8 ．   (选择步骤)小心抽去缓冲液
9 ．  加入 xx 微升上述配制的 染色工作液到96 孔板中每一个孔里
10．放进 37℃培养箱里，孵育 2 小时(可见溶液呈现黄色)
11．即刻放进酶标仪测读：染料波长 405nm；参考波长 690nm
12 ．实际读数： OD405－OD690
13．绘制细胞生长曲线：纵座标(Y 轴)为吸光值(OD)；横坐标(X 轴)为细胞数

注意事项
1 ．  本产品为 100 次(1个 96 孔细胞培养板)操作
2 ．  操作时须戴手套
3 ．  整个操作须无菌操作，细菌感染会造成检测异常
4 ．  建议 96 孔板里的细胞量在 1000 至 100000 范围为理想状态
5 ．  孵育时，须避光
6 ．  建议使用无细胞空对照作为背景读数
7 ．  悬浮细胞(例如血白细胞等)建议使用直接检测法
8 ．  如果细胞密度过低，可以延长孵育时间至 4 小时
9 ．  含有酚红的培养液容易增加背景读数，而造成敏感性降低
10．直接检测法要求每个孔的培养液容量等同，避免误差
11．本公司提供系列细胞繁殖和毒性检测试剂产品

质量标准
1 ．  本产品经鉴定性能稳定
2 ．  本产品经鉴定着色清晰

使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后， 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系，并将该产品退回， 经检验确系产品质量所致， 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK ，  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
编号        规格
G&VS10083    酸性磷酸酶(AP) 活力法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒        100 次
G&VS10083A    缓冲液(Reagent A)                    100 毫升
G&VS10083B    染色液(Reagent B)                    10 毫升






产品编号        产品名称                规格
G&VS10007    结晶紫细胞群落染色试剂盒        250 次
G&VS10008    细胞活力蓝色荧光检测试剂盒        50 次
G&VS10009    细胞活力台盼蓝染色试剂盒        100 次
G&VS10029    中性红细胞繁殖比色法定量检测试剂盒    500 次
G&VS10039    MTT 比色法细胞繁殖测定试剂盒        500 次
G&VS10043    MTS 细胞繁殖定量检测试剂盒        500 次
G&VS10044    绿色荧光细胞繁殖定量检测试剂盒    500 次
G&VS10045    PICOGREEN 细胞繁殖定量检测试剂盒    50 次
G&VS10046    G-B 细胞活力和凋亡检测试剂盒        50 次
G&VS10051    ATP 生物发光法法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒    50 次
G&VS10052    R-G 细胞活力和凋亡检测试剂盒            100 次
G&VS10033    BrdU 标记法细胞繁殖流式细胞仪检测试剂盒        10 次
G&VS10034    BrdU 标记法细胞繁殖显微镜检测试剂盒        10 次
G&VS10073    乳酸脱氢酶(LDH)释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒    100 次
G&VS10083    酸性磷酸酶(AP)活力法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒    100 次
G&VS10084    葡萄糖耗损法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒    500 次
G&VS10085    刃天青(Resazurin)细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒    500 次
G&VS10086    磺酰罗丹明B  (Sulforhodamine B)细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒    500 次
G&VS10087    考马斯亮蓝细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒        500 次
G&VS10036    XTT比色法细胞繁殖测定试剂盒            500 次