CAT#:JW-220322
常温运输,4℃保存

细胞核DNA纯化试剂盒（过柱法）

产品及特点
本产品是专门用于从纯化好的细胞核中提取其基因组DNA的产品，它具有下列特点：
1.快捷，整个过程室温操作约10分钟。
2.DNA纯净，大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
3.DNA产率一般在200ug/g左右。
4.得到的DNA可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
5.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
6.性价比高，质量和国外同类产品相当，但价格更便宜。
7.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品使用大扁盒包装
成份                                                编号        规格     包装
细胞核DNA纯化溶液A                220322a    20 mL    30mL本色瓶
细胞核DNA纯化溶液B                220322b    10 mL    10mL本色瓶
细胞核DNA纯化溶液C                220322c    45 mL    60mL本色瓶
离心吸附柱                                 220144       50 套    塑料袋
通用洗柱液                                 220143       50 mL    60mL本色瓶
DNA洗脱液（基因组专用）       220125       10 mL    10mL本色瓶
使用手册                                    220322sc    1份                无

运输及保存
常温运输和保存、有效期一年。

自备物品
氯仿（也可省略，但产量会降低）

使用方法
注意：细胞核DNA纯化溶液A容易产生沉淀，细胞核DNA纯化溶液B十分粘稠，用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低，用前充分摇匀。
1.用自备的试剂分离细胞核，去除细胞浆。
2.在每1-5×10E6个细胞核沉淀中加入0.4mL预热的细胞核DNA纯化溶液A，用枪充分吹打以确保细胞核全部裂解。
3.加入0.2mL预热的细胞核DNA纯化溶液B到裂解液中，盖上盖子后颠倒2分钟充分混匀。由于细胞核DNA纯化溶液B十分粘稠，可将1mL枪头剪掉一截再用。
4.65℃水浴5-10分钟。如果室温放置，DNA产量将降低10-20%。
5.加入0.2 mL自备氯仿，振荡器上充分振荡混均30秒，此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。如果没有氯仿，此步可以跳过，直接进入第8步，但DNA产率和纯度会有所降低。
6.12000-15000 g室温离心2分钟。上清透明，中间层为白膜（蛋白层）。如果没有氯仿，此步跳过。
7.小心将上清液平均转移到1个新的离心管中，避免触及中间的白膜。
8.在管中加入0.9mL的细胞核DNA纯化溶液C，颠倒半分钟混匀。
9.分两次上柱（即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000-15000 g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000-15000 g室温离心半分钟，弃穿透液）。
10.加0.7 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000 g室温离心半分钟，弃穿透液。
11.加0.3 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000 g室温离心半分钟，弃穿透液。
12.12000-15000 g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
13.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
14.将离心吸附柱转移到一新的1.5 mL塑料离心管中，加入100 uL DNA洗脱液（基因组专用），室温放置离心吸附柱1-2分钟。
15.12000-15000 g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

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