CAT#:JW-211230-50
常温运输和保存

小RNA胶回收试剂盒（过柱法）

产品及特点
本产品用于从聚丙烯酰胺凝胶电泳得到的PAGE胶条中回收所需要的小RNA片段，它具有下列特点:
1.可以回收15-200nt内的各种长度的RNA，包括100nt以下的小RNA片段。
2.过柱法回收，比沉淀法回收更见简单快捷。
3.回收率在70%左右。
4.即开即用，用户不需要自备任何试剂。
5.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
6.本试剂盒可以回收50次的小RNA。
7.本产品只能用于科研。
规格及成分
本产品使用无垫小扁盒包装
成分                                                编号        规格    包装
过柱法小RNA胶回收溶液A    211230a        10mL    10mL本色瓶
过柱法小RNA胶回收溶液B    211230b        10mL    10mL本色瓶
过柱法小RNA胶回收溶液C    211230c        10mL    10mL本色瓶
过柱法小RNA胶回收溶液D    211230d        25mL    30mL本色瓶
通用洗柱液                               220143        30mL    30mL本色瓶
RNA洗脱液                                971207        1.5mL    1.5mL蓝盖管
离心吸附柱                                220144        50个    拉封塑料袋
使用手册                                    211230-50sc    1份    无

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂
PAGE胶，RNase-free离心管和移液抢头

使用方法
1.切取含小RNA片段的PAGE凝胶（可以跑两个平行样，将其中一个泳道的胶进行银染或用其它染色，出现RNA条带并选定要回收的条带后，将染色的胶和其对应的、还没有染色的胶并排放置在一起，记下小RNA条带的位置，其在没有染色胶的对应位置上也应该有小RNA条带，切下此位置的凝胶进行后续处理）。凝胶重量要在100mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率。
2.将切下的PAGE凝胶条放到一个自备的1.5mL RNase-free离心管中，用移液枪头尽可能将其捣碎，捣得越细越好。
3.加入200μL小RNA萃取液。
4.将离心管水平放置（不是竖立放置）在摇床上并室温摇晃3小时以让小RNA从PAGE凝胶中被萃取出来。如果回收的RNA片段长度超过100nt，摇晃时间应适当延长。
5.12000g室温离心1分钟，将含RNA的上清液转移到一个1.5mL RNase-free塑料离心管中。
6.加入200μL过柱法小RNA胶回收溶液B、200μL过柱法小RNA胶回收溶液C和500μL过柱法小RNA胶回收溶液D，快速混合均匀，立即进入下一步。注意：混合后需要立即进入下一步，否则极易形成沉淀。
7.迅速将0.55mL混合液转移到离心吸附柱中，静置3分钟以便让RNA跟吸附膜结合，然后再12000g离心1分钟，弃收集管中的液体。
8.再将剩下的0.55mL混合液转移到离心吸附柱中，静置3分钟以便让RNA跟吸附膜结合，然后再12000g离心1分钟，弃收集管中的液体。
9.加入600μL通用洗柱液于离心吸附柱中。12000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
10.12000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
11.将离心吸附柱置于一个1.5mL RNase-free离心管中，加入30μL RNA洗脱液，静置3分钟。
12.12000g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的RNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。

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