绿色荧光细胞繁殖定量检测试剂盒产品说明书

主要用途
绿色荧光细胞繁殖定量检测试剂是一种旨在通过使用绿色荧光染料自由进入活细胞， 并与细胞中 普遍存在的谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S－transferase)的结合而产生荧光信号来定量测定活体细胞繁 殖的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适用于各种贴壁生长中 的动物或人体细胞。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，简捷敏感，荧光清晰。

技术背景
作为细胞染色剂之一的绿色荧光染料特异性地与细胞中普遍存在的谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione  S － transferase) 结合产生非永久性的荧光染料硫醚加合物而留存在细胞内， 其乙酸基团水解后所产生荧光的吸 收峰是 490nm，而散射峰是 520nm。

产品内容
清理液(Reagent A)    毫升
染色液(Reagent B)    微升
稀释液(Reagent C)    毫升
产品说明书    1 份

保存方式
保存 染色液(Reagent B) 在－20℃冰箱里， 其余的保存在4C冰箱里， 染色液(Reagent B)避免光照，有效保证 6 月

用户自备
15 毫升锥形离心管：用于染色工作液配制的容器
荧光酶标仪：用于定量检测染色后的荧光细胞
完全细胞培养基(G&VS12052)：用于细胞的继续培养

实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的 染色液(Reagent B) 置于室温下融化， 稀释液     (Reagent C) 放进 37℃恒温水槽里预热。然后移出 xx 毫升 稀释液(Reagent C) 到新的 15 毫升 锥形离心管， 加入 xx 微升 染色液(Reagent B)，混匀后， 在室温下静置， 并标记为 染色工 作液， 放在暗室里。然后进行下列操作。
1 ．  准备 96 孔细胞培养板的待测细胞(药物处理的目标细胞)和标准细胞(作为标准曲线的构建) 标准贴壁细胞数的设置： 0 ，100 ，1000 ，5000 ，10000
2 ．  到规定的检测时间点，从细胞培养箱里取出待测的 96 孔细胞培养板
3 ．  小心抽去每孔中的培养液
4 ．  小心加入 xx 微升 清理液(Reagent A) 到 96 孔板中每一个孔里
5 ．  小心抽去每孔中的 清理液(Reagent A) (注意： 确保培养孔中无任何液体残留)
6 ．  小心加入 xx 微升含有 染色液(Reagent B) 和 稀释液(Reagent C) 的 染色工 作液到 96 孔板中每一个孔里
7 ．  放进 37℃培养箱里，孵育 15 分钟
8 ．  即刻放进荧光酶标仪里测读：滤波器激发波长 490nm，散发波长 520nm，闪烁次数 10，间隔时间 0.5 秒 ――记录相对荧光单位(RFU)
9 ．  绘制标准曲线或细胞生长曲线： 纵座标(Y 轴) 为相对荧光单位(RFU)；横坐标(X 轴) 为细胞数或 时间点或药物浓度
10．加入 150 微升用户自备的细胞培养液到 96 孔板中每一个孔里
11．放回 37℃，5%CO2细胞培养箱里继续培养

注意事项
1 ．  本产品为 500 次(5 个 96 孔细胞培养板)操作
2 ．  染色液(Reagent B) 可以自由进入细胞
3 ．  本产品适宜于贴壁细胞的繁殖检测
4 ．  操作时须戴手套
5 ．  整个操作须无菌操作
6 ．  建议 96 孔板里的细胞量在 100 至 100000 范围为理想状态
7 ．  建议起始细胞数为 1000 为理想状态；用户可以根据需求确定起始细胞数
8 ．  孵育时，须避光
9 ．  细胞培养液中的酚红会干扰荧光检测，因此在加入 染色工作液前，确保培养孔里无培养液 残留，否则增加背景噪音
10．使用新鲜配制的染色工作液，务必不要超过 2 小时，且注意避光
11．本公司提供系列细胞繁殖检测试剂产品

质量标准
1 ．  本产品经鉴定性能稳定
2 ．  本产品经鉴定荧光性强

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货 后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定， 保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题， 请立即以书面形式(实验报 告)与本公司联系， 并将该产品退回， 经检验确系产品质量所致， 本公司负责更换产品。如系使用者错误 操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK ，  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息        
编号        名称                规格
G&VS10044    绿色荧光细胞繁殖定量检测试剂盒    500 次
G&VS10044A    清理液(Reagent A)            500 毫升
G&VS10044B    染色液(Reagent B)            100 微升
G&VS10044C    稀释液(Reagent C)            500 毫升
产品编号        产品名称                规格
G&VS10007    结晶紫细胞群落染色试剂盒        250 次
G&VS10008    细胞活力蓝色荧光检测试剂盒        50 次
G&VS10009    细胞活力台盼蓝染色试剂盒        100 次
G&VS10029    中性红细胞繁殖比色法定量检测试剂盒    500 次
G&VS10039    MTT 比色法细胞繁殖测定试剂盒        500 次
G&VS10043    MTS 细胞繁殖定量检测试剂盒        500 次
G&VS10044    绿色荧光细胞繁殖定量检测试剂盒    500 次
G&VS10045    PICOGREEN 细胞繁殖定量检测试剂盒    50 次
G&VS10046    G-B 细胞活力和凋亡检测试剂盒        50 次
G&VS10051    ATP 生物发光法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒    50 次
G&VS10052    R-G 细胞活力和凋亡检测试剂盒        100 次
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